Th22细胞及IL-22相关功能分子在慢性HBV感染中的作用与机制研究

Th22细胞是最新鉴定出的一类以分泌IL-22为主但不分泌IL-17或IFN-γ新型辅助性T细胞，在慢性炎症中发挥重要作用，但其在慢性HBV感染中尚无研究报道。本课题组前期的研究发现慢性乙肝患者肝内Th22主要效应分子IL-22及CXCL-9/10/11的表达与患者肝组织炎症损伤和肝纤维化呈负相关，Th22相关的效应分子可能在肝脏炎症损伤中发挥协同保护作用，首次将慢性乙肝炎症损伤修复与Th22细胞及IL-22相关功能分子联系起来。本项目拟采用慢乙肝患者及HBV转基因小鼠的外周血和肝组织标本，进一步深入研究慢性乙肝患者不同炎症期Th22细胞在外周血中的频数和功能，以及它们在肝内的浸润程度与肝脏炎症损伤和纤维化发生、发展的关系，并阐明Th22细胞和IL-22相关功能分子在HBV持续感染中的作用与机制，为慢性乙型肝炎的免疫治疗提供新的思路和方法。

免疫炎症反应在慢性乙型肝炎及慢加急性肝衰竭的发生和进展过程中起到重要作用，Th22细胞是近几年鉴定发现的一类新型T细胞亚群（IL-22作为其主要效应分子），其在自身免疫性疾病、病原体的感染免疫、炎症损伤，特别是肝细胞再生中发挥重要作用，但是Th22细胞及其效应分子IL-22在HBV慢性感染及慢加急性肝衰竭的免疫发病机制中的作用尚不明确。本研究首先招募慢性乙型肝炎及慢加急性肝衰竭患者入组，分离外周血单核细胞及血浆，通过流式细胞术及酶联免疫吸附测定法（ELISA）发现外周血Th22细胞频数及血浆中IL-22的表达变化，同时通过免疫组化检测肝组织中IL-22的表达。然后通过qPCR检测患者PBMC中与Th22等辅助性T细胞亚群相关的转录因子（AHR、RORc及T-bet）的变化。并通过PBMC和HBV核心蛋白（HBCAg）体外共培养，探讨HBV病毒抗原对免疫细胞分泌IL-22的影响。最后动态随访ACLF病人的外周血Th22细胞频数及血浆中IL-22水平的变化。在ACLF病人中，Th22细胞和MELD评分呈现良好的正相关性。在ACLF病人中，其Th22细胞频数及血浆中IL-22持续在高水平往往提示预后不佳。这些研究结果有助于进一步了解慢加急性肝衰竭及慢性乙型肝炎的免疫发病机制并提供可能的免疫治疗靶点，并有可能作为评价ACLF预后的一个生物学标记物。