生殖道外用药物局部黏膜免疫炎症反应的基础研究

本研究旨在建立女性生殖道外用药物的阴道黏膜免疫炎症的体外模型（细胞模型、组织模型）和动物模型（小鼠、兔和小型猪），从不同层次上研究生殖道外用药物诱发阴道黏膜刺激性及免疫炎症反应的机制及其临床前毒理学评价技术。拟对经典的兔阴道黏膜刺激试验模型进行扩展与优化，在原有组织病理学评价终点的基础上，增加更为敏感特异的分子水平上的评价终点，包括CVLs中IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ、RANTES 和MIP-1等可溶性炎症因子和趋化因子的检测、CD4、CD8、CD11b和CD45等免疫细胞表面标志物分子的检测、以及阴道黏膜上皮细胞凋亡免疫荧光染色、阴道菌群检测等。通过上述研究，期望能够科学合理地反映出生殖道外用药物诱发黏膜炎症毒性程度，并对黏膜免疫系统的激活情况进行更全面的评估，为今后生殖道外用新药的研发奠定基础。

本研究旨在建立女性生殖道外用药物的阴道黏膜免疫炎症的体外模型（细胞模型、组织模型）和动物模型（小鼠、兔和小型猪），从不同层次上研究生殖道外用药物诱发阴道黏膜刺激性及免疫炎症反应的机制及其临床前毒理学评价方法和技术体系。. 通过本项目的实施，建立了阴道药物阴道黏膜刺激性和免疫炎症反应的VK2/E6E7、Ect1/E6E7和End1/E6E7三种细胞系模型；以及阴道药物阴道黏膜刺激性和免疫炎症反应的小鼠、兔和小型猪三种动物模型。拟定了阴道药物临床前阴道黏膜刺激性毒理学评价和技术体系，包括三种动物模型的病理组织学研究、阴道灌洗液中炎症因子研究、黏膜及黏膜下免疫因子的测定、原位凋亡测定。运用上述模型和评价指标，检测了酸性热敏凝胶剂、脱氧胆酰酪氨酸凝胶、B07热敏凝胶剂等三种候选新药。研究结果提示，该体系可较为全面地反映出阴道药物诱发黏膜炎症毒性的程度，为国内该类药物（包括外用避孕药、抗HIV的杀微生物剂、阴道润滑剂等）局部刺激性的临床前安全性评价提供技术方法和科学依据，为人口和生殖健康工作提供有力的科技支撑。本项目首次在国内运用小型猪模型评价生殖道外用药物对阴道黏膜的刺激性和免疫炎症反应，并证实了其可行性。. 通过本项目发表了发表论文15篇，其中会议论文1篇，硕士研究生毕业论文1篇，SCI论文2篇；申请了国家发明专利3项，获授权国家专利4项；在国际会议上做报告2次；培养专业人员及研究生6名。