转录抑制子ZBTB8A在胃癌细胞凋亡中的作用机制研究

本课题组克隆得到ZBTB家族一新的成员ZBTB8A，发现该基因在胃癌细胞AGS的凋亡模型中明显上调表达。经细胞亚定位，荧光素酶报告基因转激活系统分析，证实该基因在细胞核中呈颗粒状分布，为HSE元件抑制型转录调控因子，推测ZBTB8A可能通过结合HSE元件调控HSP蛋白参与了胃癌细胞的凋亡。本研究拟采用EMSA， ChIP验证ZBTB8A与HSE元件的结合特异性；并通过ZBTB8A的过表达与RNAi下调表达，研究不同状态下AGS的细胞学功能变化；通过串联亲和层析、GST pull-down、 免疫共沉淀等方法来检测与ZBTB8A有相互作用的蛋白并验证其相互作用的真实性和生物学意义，揭示它在胃癌细胞凋亡过程中的调控机理，同时进一步分析ZBTB8A在胃癌组织中的表达变化。对该基因的功能研究具有源头创新性，为今后临床治疗和诊断胃癌提供新的思路和信息。

本课题组克隆得到ZBTB家族一新的成员ZBTB8A，发现该基因在胃癌细胞AGS的凋亡模型中明显上调表达。经细胞亚定位，证实该基因在细胞核中呈颗粒状分布。为了研究该基因的生物学功能，我们成功制备了ZBTB8A的多克隆抗体。通过酵母双杂交体系筛选鉴定出与ZBTB8A可能互作的蛋白因子。利用GST pull-down、 免疫共沉淀等方法来检测与ZBTB8A有相互作用的蛋白并验证其相互作用的真实性，为进一步探索这些互作的生物学意义奠定基础。受该基金资助还开展了ZNFD以及ZBTB1和ZBTB9等基因功能的研究；评估了人群中hOGG1基因Ser326Cys（rs1052133）多态性与食管鳞状细胞癌易感性的关系；利用共表达量、宿主基因和miRNA簇探索了旁系同源miRNA区分方法。受该基金资助发表SCI论文累计影响因子达12分。