慢性乙型肝炎→肝硬化→肝癌进程中microRNA21的表达及作用机制研究

在我国原发性肝癌患者中，大多数均经历了慢性乙型肝炎→肝硬化→肝癌病情演化过程。本课题采用miRNA表达谱芯片分析正常肝脏、慢性乙型肝炎、肝硬化和肝癌组织中microRNA21（ miR-21）表达水平，用Northern Blot和miRNA qRT-PCR验证其结果，并在肝硬化、肝癌动物模型上验证其表达；使用生物信息学预测miR-21的靶基因，将靶基因的3′UTR区融合进荧光素酶报告基因，检测其对内源性、外源靶点的抑制作用，确认miR-21的靶基因及其传导通路；特异降低miR-21的表达，检测对细胞生长的影响，将miRNA抑制剂注入动物模型内并观察动物的表型，从而确定治疗的靶点，并研究miR-21是否通过抑制凋亡相关基因成为肝癌对化疗不敏感的原因。通过探讨病情演化过程中miR-21及其靶基因的作用机制，进一步阐明肝癌的发病机制，以阻断肝硬化→肝癌进程，探索治疗原发性肝癌新的有效策略。