针对潜伏感染期的结核病治疗性疫苗的实验研究

结核杆菌长期处于潜伏感染状态是目前在全世界范围内消灭结核病的最大阻碍之一。 国际上进入临床研究的11种疫苗只能控制结核杆菌的早期感染，对于潜伏期感染的细菌则效果不明显。而结核分枝杆菌由潜伏期向活动期的转化是宿主和病原菌共同作用的结果。本研究从病原菌和宿主两方面设计针对潜伏感染期的结核病疫苗，首先构建了包含Ag85B 、Rv3425和潜伏期抗原Rv1733c、Rv2029c或Rv1986的新型多价DNA疫苗。再次通过宿主免疫系统的调节来提高疫苗的免疫记忆：一方面增加正向调节的IL-7/IL-15两种免疫记忆相关的细胞因子，另一方面阻断抑制免疫反应的负调节因子IL-10R。通过对潜伏感染期的小鼠模型进行治疗实验，希望筛选到高效的疫苗和细胞因子联用的针对潜伏感染期的结核病治疗新策略。并深入探讨IL-7、IL-15及anti-IL-10R抗体在调节结核疫苗免疫记忆中的作用。

目前结核杆菌长期处于潜伏感染状态已成为消灭结核病的一个重大阻碍，成人结核病中内源性复发占很高比例，控制结核潜伏感染对结核病防治具有重要意义。目前，世界唯一临床批准用预防结核疫苗-卡介苗不能针对休眠期细菌产生免疫反应而预防LTBI复发，而已进入临床试验的疫苗也没有能将结核分枝杆菌完全清除的。当机体免疫力下降时，处于潜伏感染状态的结核杆菌开始生长，导致组织损伤或死亡。因此，研究针对潜伏感染人群的结核杆菌疫苗至关重要。. 本研究成功构建了三株针对结核潜伏期的DNA疫苗：Ag85B-Rv3425-Rv1733C、Ag85B-Rv3425-Rv2029c、Ag85B-Rv3425-Rv1986，通过小鼠体内的免疫原性评价筛选到一株DNA疫苗即Ag85B-Rv3425-Rv2029c，能引起强烈的Th1型免疫反应，CD4T细胞增殖，参与CTL反应的CD8+T细胞比值增加，具有良好的免疫效果。正在进行Ag85B-Rv3425-Rv2029c联合IL-7、IL-15及anti-IL-10R潜伏感染治疗效果评价。Ag85B-Rv3425-Rv2029c有望成为一株针对结核分枝杆菌潜伏感染的新型候选疫苗。. 本研究中我们选择Rv3425为构建DNA疫苗的抗原之一， 我们的研究发现Rv3425是巨噬细胞TLR2的配体，可激活巨噬细胞活性并提高其抗原递呈能力，可促进有利于抗结核感染的TH1型免疫反应，因此Rv3425是优良抗原，可提高DNA疫苗的免疫原性和保护效果。DNA疫苗可用于治疗性疫苗，同时也可用于卡介苗免疫后的加强免疫，我们的研究发现针对Ag85B和Rv3425的DNA疫苗，较蛋白亚单位疫苗或以病毒为载体的疫苗能更有效的加强卡介苗的保护效果，验证了此疫苗的免疫和保护效果。. 该研究共发表SCI论文3篇，核心期刊文章1篇，申请国家专利2项。培养硕士研究生1名。