HBV诱导趋化因子MIG表达及其在介导炎性细胞肝脏浸润的机制研究

大量非特异性炎性细胞在肝脏聚集是慢性乙型肝炎病理损害的中心环节。最新研究表明，NK和NKT细胞是导致肝细胞损伤的关键，如何减轻NK和NKT细胞浸润成为目前的研究热点。我们前期研究发现能诱导NK和NKT细胞聚集的趋化因子MIG在乙型肝炎患者体内高表达，HBV可通过激活NF-κB通路调节MIG转录，并诱导体外培养活化的淋巴细胞迁移。据此我们推测，HBV可能通过诱导MIG高表达，趋化NK和NKT细胞浸润导致肝细胞损伤。因此，本课题拟建立HBV感染动物模型，研究HBV是否能在体内诱导MIG高表达以及MIG趋化NK、NKT细胞的信号转导通路机制，同时，采用基因沉寂技术和特异性中和抗体分别在基因和蛋白水平抑制MIG的活性后观察是否能有效地减少炎性细胞的浸润，减轻肝损伤。通过上述研究，探讨MIG在HBV感染后炎性细胞在肝脏聚集、肝组织损伤中的作用机制，从而为乙型肝炎免疫调节治疗寻找潜在的干预靶点。

目前认为肝组织损伤主要是HBV感染后机体免疫应答异常的结果。细胞因子分泌异常与HBV感染后肝脏炎症的慢性化及肝细胞的损伤存在密切关系。然而，到底何种细胞因子招募炎性细胞到达HBV感染后的肝脏目前尚不清楚。Mig属于CXC趋化因子家族成员，又称炎性趋化因子。我们的前期体外研究已证实，HBV可在转录水平直接激活肝细胞趋化因子Mig的表达。本项目旨在体内探讨HBV感染对趋化因子Mig表达的诱导作用及其机制，并研究Mig在肝脏炎性细胞招募和肝组织损伤中所发挥的作用。在动物模型中，我们证实腺病毒能有效地将HBV基因组导入肝细胞，表达HBV DNA、HBsAg及HBeAg，并在肝脏中形成cccDNA。同时，HBV通过激活下游信号通路不仅可直接诱导趋化因子Mig表达，还招募大量特异性和非特异性炎性细胞在肝脏聚集。使用RNA干扰技术后不仅可部分抑制Mig的表达， 还可观察到Ad-HBV组小鼠肝组织中炎性细胞迁移及炎性灶数量的减少，ALT浓度降低，但对小鼠体内HBV病毒抗原的分泌及HBV的复制无明显影响。上述研究结果有助于进一步阐明乙型病毒性肝炎的发病机制，为其免疫调节治疗提供实验依据。