肥大细胞在JEV感染致脑炎发生发展中的作用及机制研究

Epidemic encephalitis B caused by Japanese encephalitis virus (JEV) is an acute infectious disease of the central nervous system, the case fatality rate is as high as 30%, survivors often have severe neurological sequelae. Immunopathological injury in the JEV cause encephalitis was getting more attention, but the mechanism is not clear. In recent years, several studies have found that mast cells in brain parenchyma can release histamine, TNF alpha may destruct blood-brain barrier. Moreover, mast cells in the peripheral also may cross the blood-brain barrier into the brain tissue. Besides, mast cells play an important role in regulating a variety of viral infection caused inflammation injury. Our previous experiments showed that JEV can infect mast cells, and mast cells can enter the brain tissue in JEV infection model. This project will use mast cell-deficient and wild-type C57BL/6 mice to study the role of mast cells in mediating JEV infection induced encephalitis, blood-brain barrier damage, the spread of the virus, secrete of inflammatory cytokines, key PRR and molecular to recognize JEV on the levels of organism, tissues, cells and molecules. Aim to address the specific mechanism of mast cells during epidemic encephalitis B caused by JEV infection. The project will provide new perspectives for understanding pathogenesis of JEV encephalitis, and may reveal new JEV therapeutic targets.

日本脑炎病毒（JEV）引起的流行性乙型脑炎是一种中枢神经系统的急性传染病，病死率高达30%，幸存者常留下严重的神经系统后遗症。免疫病理损伤在JEV导致脑炎过程中的作用越来越受到重视，但发生机制尚不清楚。近年来，多项研究发现脑实质中的肥大细胞可释放组胺、TNF-α等破坏血脑屏障，外周中的肥大细胞也可穿过血脑屏障进入脑组织。而且，肥大细胞在多种病毒感染引起的炎症损伤中起着重要调控作用。我们前期的预实验结果显示JEV能够感染肥大细胞，乙脑模型中肥大细胞可进入脑组织。本项目将以野生型和肥大细胞缺陷型小鼠为研究对象，从整体、组织、细胞和分子四个水平研究肥大细胞在介导JEV感染脑炎发生、血脑屏障破坏、病毒扩散、炎症分子产生、识别JEV的PRR及关键分子通路，旨在明确肥大细胞在JEV感染致脑炎中的具体作用机制。本项目的完成将为理解JEV脑炎发病机制提供新的视角，并有可能揭示新的乙脑治疗靶点。

日本脑炎病毒（JEV）引起的流行性乙型脑炎是一种中枢神经系统的急性传染病，病死率高达30%，幸存者常留下严重的神经系统后遗症。免疫病理损伤在JEV导致脑炎过程中的作用越来越受到重视，但发生机制尚不清楚。近年来，多项研究发现脑实质中的肥大细胞可释放组胺、TNF-α等破坏血脑屏障，外周中的肥大细胞也可穿过血脑屏障进入脑组织。而且，肥大细胞在多种病毒感染引起的炎症损伤中起着重要调控作用。本项目通过JEV分别感染野生型和肥大细胞缺陷型小鼠并进行体重和生存率检测，结果表明，肥大细胞在JEV 感染小鼠过程中具有加剧脑组织炎症的作用。进一步检测脑组织病毒载量和血脑屏障通透性，我们发现与野生型小鼠相比，肥大细胞缺陷鼠脑组织病毒载量和血脑屏障通透性增加。在体外细胞实验中，JEV病毒可以感染并且激活肥大细胞释放促炎因子，组胺和糜蛋白酶，进一步实验发现，肥大细胞表面的c-kit受体及其下游的PI3K信号通路对JEV感染并激活肥大细胞释放促炎因子和糜蛋白酶及组胺有重要作用。以上研究结果显示，JEV感染肥大细胞后，通过c-kit受体及其下游的PI3K信号通路激活肥大细胞，增加血脑屏障通透性，导致更多病毒进入脑组织。.