基于NMDAR/Ca2+/CREB通路介导树突棘重塑研究卒中后抑郁HP-PFC联动损伤机制及中药干预

Post-stroke depression (PSD) is the most common complication of cerebrovascular disease，Significantly increased in patients with mortality and the suicide rate .However, the pathogenesis is not fully understood,It is the focus of the research of traditional Chinese medicine. Hippocampal-Prefrontal cortical circuit（HP-PFC）is an important pathway of dealing with the neural information ,which has Coordination and communication,and HP-PFC Functional disconnectivity is neural mechanism linking it to PSD.spine synapse remodelinglead to depression disorder is a fundamental factor.Previous studies found that,the glu level rise,excessive activation of NMDAR,BNDF lower level,Reduced plasticity of spine synapse,of Hippocampal and Prefrontal cortical in PSD rats.According to preliminary research base,our group intends to use laserscanning confocal,patch clamp,WB,RT-PCR methods,from the aspect of form-function-Molecular to proven that “after the stroke, the levels of glu was elevated and NMDAR was activated in which then lead to calcium homeostasis imbalance and an abnormalities of NMDAR/Ca2+/CREB signaling pathway. And finally cause disordered remodeling of spines synapse, HP-PFC Functional disconnectivity,this induce depression”the mechanism.In accordance with Chinese medicinetheory,adoption“Soothing the liver and regulating the circulation of qi,blood-activating and stasis-removing”therapeutic intervention disproof of traditional Chinese medicine,as PSD pathogenesis andprevention research to providenew ideas and new targets.

脑卒中后抑郁症（PSD）极大增加患者死亡率和自杀率，机制未阐明，是中医药研究的重点。海马-前额叶皮层环路(HP-PFC)具有协调和通讯的联动作用，是处理神经信息的关键环路，HP-PFC联动损伤，是PSD的重要机制。几乎HP-PFC所有的兴奋性突触都由树突棘构成，树突棘重塑障碍是导致PSD根本因素。前期研究发现，PSD大鼠HP-PFC环路Glu水平上升，NMDAR过度激活，BNDF水平降低，树突棘可塑性降低，海马与前额叶皮层有一定的关联性和差异性。本课题组拟采用激光共聚焦、膜片钳、RT-PCR等方法，从形态-功能-分子三方面，探明“脑卒中后，Glu水平升高，NMDAR异常活化，Ca2+稳态失衡，CREB通路抑制，HP-PFC树突棘重塑障碍，联动损伤，诱导抑郁产生”的分子机制。并根据中医理论，采用“疏肝解郁、活血化痰”治则的中药复方干预反证，为PSD的发病机制的研究及防治提供新的思路和靶点。

脑卒中后抑郁症(post-stroke depression，PSD) 在脑卒中患者中的发病率为25-79%，严重影响患者的生活质量和功能康复，是人类健康的主要杀手之一。PSD的病理机制复杂，发病机制未阐明，目前，国内外有PSD的大鼠模型及相关研究报道，但鲜见以海马-前额叶皮层环路（HP-PFC）为主要靶点进行PSD防治机制研究。开展海马、前额叶皮层等多个结构或环路研究并阐明结构、功能及分子机制是符合临床需求和客观规律的。.本研究项目开展了如下研究：（1）探讨建立脑卒中后抑郁动物模型及评价体系；（2）对防治PSD的复方中药百事乐加味方进行有效性系统评价（3）以神经保护为切入点，以NMDAR/Ca2+/CREB信号通路为研究轴，以海马-前额叶皮层环路神经元NMDAR为靶点，对百事乐加味方对PSD模型大鼠海马-前额叶皮层环路作用机制研究，进行中医药防治PSD的分子机制研究。.研究发现，采用“疏肝解郁、活血化痰”治则组方的中药百事乐加味方对PSD模型大鼠具有一定防治作用，能恢复模型大鼠体重，较好的保护脑卒中后抑郁大鼠脑神经功能，减少损伤；改善PSD模型大鼠行为学指标；病理检测发现，PSD大鼠经治疗后，神经元细胞变性、坏死等病理学改变也明显改善，抑制炎性反应。分子生物学检测表明：显著降低大鼠血清中IL-1β，IL-6、TNF-α含量；显著降低海马、前额叶皮层组织NF-κB的表达水平，具有明显的抗炎作用。显著降低海马、前额叶皮层组织Bax、Caspase-3蛋白的表达水平，升高Bcl-2表达，增大Bcl-2/Bax比值，抑制神经细胞凋亡。显著降低PSD大鼠海马、前额叶皮层NR1、NR2A、NR2B表达，上调CaMKⅡ、CaMKⅣ、CREB、BDNF、PSD95等蛋白表达。.以上结果表明，脑卒中后抑郁，海马-前额叶皮层环路神经元NMDA/Ca2+/CREB信号功能异常，突触重塑障碍，是脑卒中诱发抑郁的重要病机，据此推测，百事乐加味方防治PSD机制可能为：通过调节NMDA受体，钙依赖蛋白激酶活化，激活调控神经营养因子信号通路CREB/BDNF，增强突触可塑性，改善PSD大鼠脑神经功能，从而发挥治疗作用，是其抗脑卒中后抑郁主要机制。本研究为脑卒中后抑郁症的发病机制的研究及防治提供新的思路和靶点。