饲用植酸酶热稳定性的定向进化

植酸酶可作为一种单胃动物的饲料添加剂，使饲料中磷的利用率提高40%-60%，对提高畜牧生产效益及降低磷对环境的污染有重要意义。目前，通过基因工程菌发酵大规模廉价生产饲料用植酸酶的技术已取得突破性进展，但为减少产品在饲料加工、贮藏及应用过程中的损失，植酸酶的热稳定性仍有待进一步提高，如能通过基因工程及蛋白质工程在分子水平上对植酸酶基因进行改造，使植酸酶本身就具有良好的热稳定性是提高植酸酶应用效率的关键技术。本项目拟从自行分离的植酸酶天然高产菌株黑曲霉N25的植酸酶phyA基因出发，采用差错倾向PCR和DNA Shuffling（DNA改组）技术获得植酸酶phyA基因的突变体组合，并实现其在酵母中的分泌表达，通过高通量的酶活测定和比较，筛选出具有表达高热稳定性植酸酶的酵母基因工程菌，在较短时间内实现植酸酶热稳定性的定向进化。