合募配穴电针对内脏高敏感大鼠肠神经系统P2受体的调节及其相关中枢机制

内脏高敏感是肠易激综合征（IBS）主要病理生理特征之一，合募配穴（上巨虚+天枢穴）电针是治疗IBS的有效方法，P2嘌呤受体P2X、P2Y参与内脏高敏感发生的信号转导与传递。本项目拟通过实验研究，观察内脏高敏感IBS大鼠肠道神经系统不同亚型P2X、P2Y受体的分布与功能，通过注射荧光染料，追踪来自肠道背根神经节（DRG）中P2X、P2Y受体的表达变化，并观察合募配穴电针对内脏高敏感IBS大鼠肠道神经丛P2X、P2Y和辣椒素受体TRPV1等的影响，及对脊髓、大脑中IBS内脏高敏感相关P2X、P2Y和c-fos表达的调节，以及P2X、P2Y阻断剂介入治疗后对电针内脏高敏感性大鼠效应的影响，从肠道、脊髓、大脑不同层次探讨IBS内脏高敏感的神经信息传导机制及合募配穴电针对脑肠神经信息交流的影响，揭示合募配穴治疗IBS内脏高敏感的科学基础。

本项目通过实验研究，观察内脏高敏感IBS大鼠肠道神经系统内不同亚型P2X、P2Y受体变化，及合募配穴电针对内脏高敏感IBS大鼠肠道神经丛及背根神经节、脊髓、大脑等相应中枢P2X、P2Y受体的调节作用。.1）电针对IBS内脏高敏感大鼠P2X受体及c-fos调节作用的研究，证实IBS大鼠内脏敏感性增高，不伴随明确的肠道病理改变。IBS内脏高敏感大鼠结肠及脊髓P2X2、P2X3、P2X4和c-fos表达显著增加，电针治疗能够缓解IBS大鼠内脏高敏感，降低结肠及脊髓异常增高的P2X2、P2X3、P2X4和c-fos的表达；.2) IBS内脏高敏感性大鼠肠神经系统差异表达的P2X受体和P2Y受体筛选结果显示，P2受体中的亚型P2X1、P2X2、P2X3、P2Y1、P2Y2、P2Y4在IBS内脏高敏感性大鼠结直肠肌间神经丛中均表达增强，其中P2X3、P2X2、P2Y1与其关系更为密切；.3）电针对内脏高敏感大鼠肠神经系统及中枢P2受体调节机制研究显示，合募配穴电针治疗能够下调结直肠肌间神经丛神经元中P2X2、P2X3、P2Y1及相应背根神经节、脊髓P2X2、P2X3、P2Y1mRNA的表达，调节大脑额前皮质、扣带回前皮质P2X2、P2X3、P2Y1表达，通过对肠神经系统及中枢P2受体调节，改善大鼠内脏高敏感状态，从而发挥治疗作用；.4)电针对内脏高敏感IBS大鼠DRG神经元P2Y1信号转导途径的影响观察，证实在内脏高敏感大鼠DRG神经元表达P2Y1受体、PLC-ß、IP3-R蛋白，电针可有效下调P2Y1受体、PLC-ß、IP3-R蛋白的表达；.5)合募配穴电针对IBS内脏高敏感大鼠DRG神经元中P2X2、P2X3受体调节的研究，证实电针调节DRG神经元中P2X2、P2X3受体的异常表达。