从GABA受体活化平衡失调探讨胃食管反流病“肝胃同病”的生物学内涵

Gastroesophageal Reflux Disease (GERD), as a common disease in the digestive system, seriously influence quality of life of patients because of its characteristics of diverse clinical manifestations, easily recurrence, long course, stubborn to heal. The TCM pathological mechanism of GERD attributes to liver-qi stagnation syndrome and upward perversion of stomach qi ,whicn also named as "simultaneous disease of the liver and the stomach". Simultaneous treatment of the liver and the stomach has significant clinical effect. However, abstract comprehension of "simultaneous disease of the liver and the stomach" hinder its spread and standardized application. Receptor activation of gamma-aminobutyric acid (GABA) has closely connection with GERD, which is widely distributed in CNS, liver and stomach. Besides, the relationship of dynamic balance exists between GABAA and GABAB. Based on our former clinical and experimental research, this study is designed to detect protein expression,level of phosphorylation between GABAA and GABAB and cascade reaction of signal in accordance with the entry point of balance disorders of GABA receptor activation from CNS, liver and stomach of mouse model of GERD. At the meantime, it is to explain biological mechanism of "simultaneous disease of the liver and the stomach" combined with the intervention effect of TCM treatment. This research is to explain the scientific nature of the classical theory of TCM in a modern life science language in order to supply scientific and objective foundation for clinical application.And it will be conducive to the spreading and standardized application of the theory.

胃食管反流病是消化系统常见疾病，由于具有临床表现多样、反复发作、病程长、难以治愈的特点，严重影响患病人群的生活质量。中医学认为本病是由肝气郁滞、胃气上逆即"肝胃同病"所致，临床以"肝胃同治"疗效显著。然而目前对"肝胃同病"过于抽象化的认识影响了其推广和规范化应用。GABA受体活化与本病有密切的联系，在中枢、肝、胃都有表达，且A型与B型GABA受体间存在动态平衡的关系。本研究拟在前期临床与实验研究的基础上，以GABA受体活化平衡失调为切入点，从胃食管反流病大鼠模型的大脑中枢和肝、胃两脏，检测GABAA受体与GABAB受体蛋白表达和磷酸化程度，及其诱发的信号级联反应，同时结合中药"肝胃同治"复方的干预作用，多角度阐释"肝胃同病"的生物学机制，力求以现代生命科学语言诠释中医经典病机理论的科学本质，为临床"肝胃同治"提供客观依据，有助于该理论的推广和临床规范化应用。

胃食管反流病是脏腑相关理论“肝胃同病”的典型病种，其病变部位在食管，中医学认为食管属胃，本病是由肝气郁滞、胃气上逆即“肝胃同病”所致，临床施以“肝胃同治”复方疗效显著。然而目前对“肝胃同病” 过于抽象化的认识影响了其推广和规范化应用。γ-氨基丁酸( GABA)与本病有密切的联系，其B型受体与本病发病机制直接相关，而A型受体极有可能参与了本病焦虑、抑郁、失眠等情志异常的调控。本研究以贲门肌切开加幽门半结扎术复制胃食管反流病大鼠酸反流模型，进行 GABA 受体蛋白及其介导的神经递质的表达和分布与胃食管反流病食管局部病变的相关性研究；分析 GABAA 与 GABAB 受体活化平衡失调作用与大脑中枢及肝、食管的内在相关性研究；并进行中药“肝胃同治”复方干预效应与机制的研究。结果显示：1. GABAA、B受体在食管下段黏膜组织、肝脏组织、脑干、海马、小脑中都有明显表达。GABAA受体在模型组大鼠中的食管下段组织、肝脏组织、小脑中的表达较假手术组均明显降低（P<0.05），GABAB受体在模型组海马和小脑中的表达较假手术组明显升高（P<0.05）。2. 肝胃同治中药复方组食管下段黏膜炎症细胞较模型组明显减少，pH监测结果与模型组相比明显升高（P=0.016），与假手术组无明显差异（P=0.176）。3. 肝胃同治中药复方组GABAA受体在食管、肝脏、脑干、海马和小脑的表达较模型组均见上调；GABAB受体在肝脏、海马和小脑中的表达较模型组均明显下调。4.模型组外周血神经递质检测结果显示：5-HT、NE、CGRP、NOS、SP、VIP高于假手术组，其中5-HT、CGRP、SP、VIP有显著性差异（P<0.05），DA与假手术组无明显差异。而肝胃同治中药复方组的5-HT、CGRP、SP较模型组明显降低（P<0.05）。5. 模型组食管、肝、海马和小脑中GABAB/GABAA比值较假手术组均显著升高，而肝胃同治中药复方组均见比值的下降，其中以中剂量组的比值与假手术组最为接近。结论：胃食管反流病大鼠模型的食管、肝和脑中同时存在GABA A型与B型受体的平衡失调，并影响五羟色胺、SP物质等神经递质的分泌，疏肝和胃中药复方能通过肝胃同治，影响大脑中枢的GABA受体的分布，恢复食管、肝和脑中A型和B型两种受体平衡，调节部分神经递质，从而使食管下段pH恢复正常、改善食管的炎症。