肝失疏泄和胃失和降对胃食管反流病食道高敏感影响的研究

非糜烂性胃食管反流病（NERD）是胃食管反流病治疗的难点之一。目前研究认为食道高敏感与本病发生密切相关，然对此缺乏特异性的干预措施；中医认为肝失疏泄、胃失和降是本病发生的关键因素，但其与食道高敏感的关系尚不明朗。本项目为了研究肝失疏泄、胃失和降对食道高敏感的影响，用前期证实有效的疏肝和胃中药灌服NERD食道高敏感大鼠模型，应用免疫组化、Western Blot等方法，分析NERD食道高敏感发生的外周及中枢敏感化机制，观察疏肝和胃方、疏肝理气拆方、和胃降逆拆方对食管组织P物质和CGRP的含量影响，比较各组药物对中枢前扣带回处的NMDA受体NR2A/NR2B亚基、AMPA受体GluR2亚基以及CaMK II磷酸化蛋白表达的调控，旨在诠释中医"肝失疏泄、胃失和降"对食道高敏感的影响，揭示疏肝理气与降逆和胃在治疗NERD食道高敏感中的作用机制，为中医药治疗NERD提供科学依据。

目前研究认为内脏高敏感与NERD发生密切相关，本项目通过建立内脏高敏感大鼠模型，采用前期证实有效的疏肝和胃中药、疏肝和胃方拆方及奥美拉唑作为干预手段，应用电镜、ELISA 、免疫组化及Western Blot等方法，探讨中医“肝失疏泄、胃失和降”对内脏高敏感的影响，诠释疏肝和胃中药在治疗NERD内脏高敏中的作用机制。.研究发现：光镜、电镜下模型组与疏肝和胃方及拆方组食管黏膜相比肉眼可见明显差异，模型组光镜可见黏膜上皮细胞间隙明显增宽，乳头伸长、毛细血管扩张，基底细胞增生明显，少量炎细胞浸润；电镜可见细胞核固缩明显，染色质分布不均匀，成块状。上皮细胞间隙水肿，细胞间隙明显增宽。荧光显微镜下：模型组大鼠脑ACC处NR2A、NR2B、GluR2及CaMK II荧光强度高于正常组。疏肝和胃方及其拆方组与奥美拉唑组肉眼观察差别不甚。ELISA方法检测食管SP、CGRP显示：疏肝和胃方能够明显降低食管黏膜SP、CGRP表达，在降低CGRP表达上，疏肝和胃方优于奥美拉唑。Western Blot方法检测大脑ACC处NMDA受体亚基NR2A、NR2B，AMPA受体亚基GluR2受体及CaMKII示：疏肝和胃方能够明显降低大脑ACC处NMDA受体亚基NR2A、NR2B，AMPA受体亚基GluR2受体及CaMKII表达；在改善大脑ACC处NR2B表达上，疏肝和胃方优于奥美拉唑。免疫组化方法检测大脑ACC处NMDA受体亚基NR2A、NR2B，AMPA受体亚基GluR2受体及CaMKII示：疏肝和胃方能够明显降低大脑ACC处NMDA受体亚基NR2A、NR2B，AMPA受体亚基GluR2受体及CaMKII表达；在改善GluR2、CaMK II上，疏肝和胃方优于奥美拉唑。.通过本次研究推测SP、CGRP 参与了内脏高敏感外周机制的形成；大脑ACC处NR2A、NR2B、CaMK II及GluR2参与了内脏高敏感中枢机制的形成，因而我们进一步推测疏肝和胃方能够降低NERD模型大鼠中枢及外周疼痛相关指标的表达，改善非糜烂性胃食管反流病的内脏高敏感性。