葡萄糖调节蛋白GRP78在顺铂诱导卵巢癌细胞衰老中的作用及其分子机制

诱导肿瘤细胞衰老是逆转肿瘤化疗耐药的一种新策略，然而目前化疗诱导肿瘤细胞衰老的具体机制仍不清楚。我们在前期研究工作中利用蛋白印迹等技术发现葡萄糖调节蛋白78（GRP78）可能起到抑制卵巢癌细胞衰老的作用。本项目拟在前期研究的基础上，从临床组织、细胞、亚细胞、分子等多个水平，利用免疫共沉淀、RNA干扰、激光共聚焦、衰老相关β半乳糖苷酶活性检测等技术对GRP78参与顺铂诱导卵巢癌细胞衰老的机制进行深入研究，以明确GRP78的表达水平及其亚细胞定位等对顺铂诱导卵巢癌细胞衰老的影响，分析GRP78与DNA损伤修复基因之间的相互作用与卵巢癌细胞衰老的关系，探讨GRP78对胞浆钙离子水平的影响与衰老之间的联系，并探索通过干预GRP78基因表达从而逆转卵巢癌顺铂耐药的可能性。希望能够阐明GRP78与顺铂诱导卵巢癌细胞衰老之间的关系，从而为临床上逆转化疗耐药提供新的治疗靶点和策略。

本项目按照预定研究目标对GRP78蛋在顺铂诱导卵巢癌细胞衰老过程中的作用及分子机制进行了相关研究，取得了一定成果。初步了解了GRP78蛋白在卵巢癌顺铂敏感及耐药组织中的表达及与细胞衰老的关系；成功构建GRP78真核正义表达载体；分别检测了顺铂敏感及耐药卵巢癌细胞在顺铂诱导过程中的GRP78蛋白及衰老标志物表达情况；检测了GRP78蛋白与ATM通路相关蛋白在顺铂诱导卵巢癌细胞衰老过程中的作用机制；明确了胞浆内钙离子浓度变化与顺铂诱导衰老之间的关系。