纤毛虫RabGTPase基因分析和细胞定位

以单细胞真核生物游仆虫为实验材料，克隆在内膜转运过程中起重要作用的RabGTPase家族基因，通过基因重组技术，在大肠杆菌或酵母系统中表达RabGTPase，建立纯化技术路线，纯化RabGTPase，体外检测RabGTPase结合GTP的生物学活性。制备RabGTPase的抗体，通过免疫荧光技术，荧光和激光共聚焦显微镜观察，确定它们在内膜转运过程中的具体分布位置，分析它们在内膜转运过程中的功能。建立游仆虫、酵母、线虫、果蝇、拟南芥、人的RabGTPase家族基因的系统进化树，阐明游仆虫RabGTPase功能的系统发育，从而进一步理解游仆虫在进化中的分类地位。RabGTPase的研究为鉴定与它相互作用的上游调控因子和下游效应蛋白奠定基础，对阐明内膜定向转运、识别融合的分子机制具有重要意义。