捏脊对自闭症行为及海马Nrf2/ARE抗氧化应激通路相关因子表达的影响及机制研究

Clinical confirmed that chiropractic can improve the clinical symptoms of autism, and the relevant mechanism is not clear. Previous studies have shown that the expression of Nrf2/ARE antioxidative stress pathway in hippocampus is involved in the pathogenesis of autism.Therefore,we put forward the“chiropractic can influence the expression of Nrf2/ARE pathway related factors by oxidative stress in hippocampal and change the social behavior of autism”this hypothesis. Pregnant rats were treated by sodium valproate in construction of autism animal model,randomly divided into chiropractic group,model group,saline group,positive drug control group and sham chiropractic group, using behavioral effects of chiropractic,observation of chiropractic methods of social behavior and histological changes autistic rats,using IHC,RT-PCR,Western blot and other means of detection hippocampal Nrf2/ARE antioxidative stress pathway related factors,evaluating of chiropractic treatment effect,and the mechanism of miRNA pathway was further explored.It will provide new scientific basis for the application of chiropractic in early intervention in autism.

临床证实，捏脊可以改善自闭症临床症状，而相关机制不清亟待探索。前期研究显示，海马Nrf2/ARE抗氧化应激通路相关因子的表达参与自闭症鼠的发病过程。因此，我们提出“捏脊可以通过影响海马Nrf2/ARE抗氧化应激通路相关因子的表达进而改变自闭症鼠的社会行为”这一假说。利用丙戊酸钠处理孕鼠的方法构建自闭症动物模型，随机分为捏脊组、模型组、生理盐水组、阳性药物对照组、假捏脊组，采用行为学、组织学等方法观察捏脊对自闭症鼠社会行为的影响，采用免疫组织化学、RT-PCR、Western blot等手段检测海马Nrf2/ARE抗氧化应激通路相关因子的表达，评价捏脊治疗效应，并通过探讨miRNA对该通路的调控进一步探索其作用机制，为捏脊在自闭症早期干预中的应用提供新的科学依据。

捏脊治疗方法简单、安全、易实施、无副作用，广泛应用于自闭症临床康复。明确基于捏脊对自闭症社交行为调节及其神经分子基础，为未来临床干预手段的进一步完善提供证据支持。本研究以自闭症动物模型为载体，从捏脊治疗自闭症鼠疗效机制方面进行了初步的探索。在建立自闭症动物模型的基础上，开展了实验动物捏脊治疗干预。但捏脊治疗动物实验实施过程中发现，实验操作者不容易对治疗部位、力度、深度等治疗要素进行精准把控，且实验人员人为因素对实验结果有一定影响，容易出现结果偏差。同时对实验方法不易进行量化描述等问题。因此，构建了捏脊动物实验平台。该平台可实现对实验动物进行标准化、可量化捏脊操作，并可对实验操作力度、深度、推拿行程进行量化设置及数据记录，实现自动化，减少外部干预因素影响，为后续捏脊等推拿实验动物研究提供了强有力的技术支持和保障。Nrf2是调控细胞对抗氧化损伤的关键转录因子。Nrf2基因敲除小鼠对丙戊酸钠毒性的敏感性增加。Nrf2/ARE抗氧化应激通路Nrf2因子的表达与丙戊酸钠毒性、自闭症鼠社交行为有关。另外，从大量理论研究上看，氧化应激、肠道菌群失调相互作用，捏脊对自闭症的治疗极有可能是通过调节上述机制协同发挥治疗作用。