用质谱联合生物信息学技术建立原发性IgA肾病和非IgA肾病鉴别诊断的数学模型

Immunoglobulin A nephropathy (IgAN) is the major constituent of glomerulonephritis in China, about 30% of which could develop to ESRD among 20 years. However, early diagnosis and early treatment could delay the development of IgAN. So, study the diagnostic method especial differential diagnostic method is as needed. Previous study showed there were 9 serum peptides had difference between IgAN and non-IgAN, which indicated serum peptides may have application prospect in the area of differential diagnosis. So, the purpose of this proposal is to search different serum peptides between IgAN and non-IgAN and to establish the differential diagnostic model. Meanwhile, identify the different peptides to dicover related biomarker.

IgA肾病（IgAN）是我国主要的原发性肾小球疾病，约30%在20年内发展成终末期肾病，而准确合理的早期诊断与防治可有效延缓病情的发展，因此探索可行的早期诊断特别是鉴别诊断方法十分必要。前期工作表明用质谱结合生物信息学技术获得了IgAN和非IgA肾病（non-IgAN）分类模型及9个差异多肽，提示该技术方法在IgAN和non-IgAN鉴别诊断和早期诊断中均具有潜在应用前景。本课题的目的是探索IgAN和non-IgAN血清多肽并建立鉴别诊断模型。同时对发现的具有应用前景差异多肽进行鉴定，为发现IgAN和非IgA肾病相关特异生物标志奠定基础。

IgA肾病（IgAN）是我国主要的原发性肾小球肾炎，约30%在20年内发展成为终末期肾病。目前确诊手段是基于“肾活检”的肾组织病理学检查，缺乏其他辅助的鉴别诊断的方法。探索可行的鉴别诊断的方法十分必要。本项目的目的是建立与血清多肽相关的原发性IgA肾病鉴别诊断的数学模型。研究内容包括适用于血清多肽质谱分析的采血管和室温放置时间选择实验，建立获得明确病理诊断的慢性肾脏病血清生物样本库和信息资源库，测定生化指标和血清多肽，最后用生物信息学软件和统计学软件分析获得的数据。条件选择实验结果表明，临床常用的5种采血管血清多肽具有差异，最适用的采血管为带分离胶的真空采血管；血样在离体后经离心可在室温下放置24小时内的血清多肽结果几乎无变化，放置6小时的样本最适合进行质谱分析。经过筛选795例病例纳入研究（275例IgAN，520其它肾病），随机选取约50%的案例作为训练组（152例IgAN，241Non-IgAN），其余的案例作为验证组（123例IgAN，279例Non-IgAN）。结果表明6项一般资料、23项实验室检测项目、44个血清多肽在IgAN组和Non-IgAN组中具有差异；应用Logistic回归建立诊断模型，结果表明，一般资料+实验室项目+血清多肽这一模型的诊断水平可达91.5%，372例新数据验证模型的诊断准确性可达85.7%；模型与IgAN鉴别诊断有意义的12项指标（年龄、是否有糖尿病、血清白蛋白水平、血清肌酐水平、血清乳酸脱氢酶水平、凝血酶时间、血浆活化部分凝血活酶时间、血浆纤维蛋白原、血清IgA和IgG水平、质荷比为2021.8和4301.8的血清多肽）。经二级质谱，鉴定了8个差异峰，分别是质荷比为1450.4、2081.8、2660、2862.4、2899.6、3158.4、3191.8、3289.3的血清多肽峰，从属于α纤维蛋白原前体、白蛋白、前白蛋白、补体C3f、纤维蛋白原α链亚型α前蛋白原、ITIH家族相关蛋白。本研究应用高通量的质谱分析，结合临床实验室检查和内科检查，得到了不需要进行“肾穿”就能对慢性肾脏病患者进行IgA鉴别诊断的数学模型，这一模型的准确性可达到85.7%，预测概率越大，IgA的可能性就越大，弥补了条件不利或作训时、战争灾难时、人员设备环境不足时无法“肾穿”进行诊断的缺漏。