apoM在SR-BI介导的抗动脉粥样硬化中的作用机制

Macrophages is the main effector cell in atherosclerosis formation. Scavenger receptor class B type I (SR-BI), originally identified as a receptor able to bind to HDL, plays a key role in the protection against atherosclerosis by mediating the efflux of cholesterol. The present study suggestted that apolipoprotein M (apoM) is also involved in the process of reverse cholesterol transport. But the exact mechanism remain to be clarified. Recently, We found the binding capacity of macrophages with apoM in SR-BI gene knock-out mice was significantly decreased ,comparing with wild-type mice. It suggestted that apoM may be involved in the binding to SR-BI in the surface of macrophages. Perhaps apoM participate in SR-BI induced signaling and activated some downstream signaling molecules.In this study we want to investigate apoM signal transduction pathways by SR-BI in macrophages using knock-out mouse model in vivo and in vitro.?Our findings raise the possibility that strategies aimed at the mechanism of cholesterol efflux induced by SR-BI and apoM signaling.It may be effective for treating human atherosclerotic cardiovascular disease.

巨噬细胞是动脉粥样硬化形成的主要效应细胞，其表面表达的清道夫受体（scavenger receptor class B type I ，SR-BI）可以介导胆固醇逆向转运，在抗动脉粥样硬化过程中起到关键作用。目前的研究结果提示，载脂蛋白M（apoM）也参与了胆固醇逆转运过程，但其具体机制尚不明了。我们在前期的研究工作中发现，在体外，与野生型小鼠相比，SR-BI基因敲除小鼠的巨噬细胞与apoM的结合能力显著下降，提示apoM可能参与了与SR-BI的结合。那么apoM是否有可能通过SR-BI介导的信号途径参与胆固醇逆转运，进而发挥其抗动脉粥样硬化的作用？本项目拟在现有研究基础上，利用已建立的基因敲除小鼠模型，通过体内外实验分析apoM与SR-BI的结合方式及其介导的下游信号通路，初步阐明apoM在抗动脉粥样硬化中的作用机制，为抗动脉粥样硬化的治疗提供一些新的思路。

巨噬细胞是动脉粥样硬化形成的主要效应细胞，其表面表达的清道夫受体（scavenger receptor class B type I ，SR-BI）可以介导胆固醇逆向转运，在抗动脉粥样硬化过程中起到关键作用。目前的研究结果提示，载脂蛋白M（apoM）也参与了胆固醇逆转运过程，但其具体机制尚不明了。我们在前期的研究工作中发现，在体外，与野生型小鼠相比，SR-BI基因敲除小鼠的巨噬细胞与apoM的结合能力显著下降，提示apoM可能参与了与SR-BI的结合。在本研究中，我们主要完成了以下工作：（1）利用自主制备的高亲和力、高纯度的小鼠抗人apoM单克隆抗体，成功分离HDL组分中apoM＋ HDL和apoM－ HDL颗粒，通过体外检测证实THP-1细胞表面apoM– HDL、apoM+ HDL和重组人apoM与SR-BI蛋白之间存在相互作用。（2）利用体外诱导人单核细胞株THP-1分化为巨噬细胞，构建体外泡沫细胞模型，通过全基因组芯片扫描及luminex蛋白检测比较apoM– HDL、apoM+ HDL与SR-BI蛋白结合后活化的下游信号的差异。初步证实与apoM－ HDL相比，apoM＋ HDL抗炎作用更为显著。apoM＋ HDL和apoM－ HDL处理组活化的信号途径主要为细胞因子/细胞因子受体信号途径、MAPK信号途径、粘附分子信号途径。apoM+ HDL可能在促进斑块稳定性方面具有一定的作用。（3）通过体外实验初步证实，apoM+ HDL组的外流率明显大于apoM－ HDL组，含有apoM的HDL颗粒能更有效的促进胆固醇外流。