针对结构未知酶的高效定向进化策略研究

定向进化是改造酶、获取进化子的重要方法。对于结构未知酶，通常的定向进化策略是：先构建随机突变文库，然后用高通量筛选方法获取进化子。由于随机突变文库中的突变大多为中性或有害突变，仅少量为有益突变，因此欲获得进化子则需做大量筛选工作，超常筛选工作量已成为结构未知酶定向筛选的瓶颈。针对这一问题，本项目提出了一个全新的定向进化策略，将大大减轻筛选工作量、达到有效改造酶的目的，作为一种自主创新的策略将使我国在定向进化领域占有一席之地，促进我国生物技术产业的发展，具有巨大的潜在经济价值；其中的"致死点突变筛选"也可发展成蛋白质研究新方法，以帮助人们获取酶活性位点信息。同时在国际上首次利用该策略改造谷胱甘肽S-转移酶Zeta类，阐明其结构-功能关系，以拓展其应用空间。