Foxo1参与活化nTregs CD127表达上调的机制研究

The homeostatic proliferation of natural regulatory T cells are the basis for its immunosupressive function, and the expression of IL-7Rα（CD127）on T cells are pivotal for its homeostatic regulation. In contrast to conventional CD4 T cells(Tconts), regulatory T cells (Tregs) significantly up-regulated CD127 expression during activation. We postulated that the low level phosphorylation of foxo1,the key transcription factor for the expression of CD127, may participate in the formation of this phenomenon.By using immunoblotting, flow cytometry, confocal microscope and gene knockout, we are scheduled to observe differences of cell signal transduction, transcription factors, cell cycle related proteins, apoptosis related proteins among silent, activated Tregs and Tconts. We also prepare to interfer PI3K/Akt pathway to observe its effects on CD127 expression. On the basis of the results, we hope to clarify the celluar mechanisms of CD127 upregulation after nTregs activation. Our research will help to elucidate the celluar mechanisms of the regulation of nTregs proliferation, And establish foundation for cell therapies for the induction of transplant tolerance and treatment of autoimmune diseases.

天然调节T细胞（nTregs）的稳态增殖是其持续发挥免疫调节作用的基础，而IL-7Rα（CD127）表达水平的调控是T细胞稳态增殖的关键。nTreg CD127的表达上呈现与效应CD4+T细胞(Tcont)完全相反的独特模式，其机制不清。我们推测，核转录因子Foxo1在活化nTreg的低水平磷酸化有可能是介导这一现象的关键环节。研究拟采用免疫印迹、FACS、激光共聚焦、基因敲除等手段，对比观察小鼠静息和不同活化态nTregs、Tcont在细胞信号转导分子、CD127、Foxo1等转录因子、细胞周期相关蛋白、凋亡相关蛋白表达的差异，以及干扰PI3K/Akt通路对CD127表达的影响，分析在活化nTreg介导IL-7Rα表达的细胞内机制。研究结果将有助于深入认识调控nTreg增殖和免疫抑制活性的细胞内机制，为寻找特异性药物作用靶点，设计采用细胞治疗诱导移植免疫耐受和治疗自身免疫性疾病奠定基础。

本研究旨在通过免疫印迹、FACS、激光共聚焦、基因敲除等手段，对比观察不同活化态Treg、T cont 在细胞信号转导分子、CD127、Foxo1 等转录因子等的表达差异，并考察数条信号通路对CD127 表达的影响，分析Treg 介导IL-7Rα表达的细胞内机制。. 按照计划，我们基于细胞和动物研究，通过分子生物学、细胞生物学、免疫学等实验技术，解析了Treg细胞胞内Foxp3、FoxO1、IL-7Rα等一系列因子的内在联系，揭示出Treg细胞的活化、凋亡机制。我们发现，Treg细胞的Foxp3在抑制HDAC1的表达后，降低了其与FoxO1启动子结合的能力，从而使得FoxO1表达受抑，也促进了IL-7Rα的持续低表达。同时，FoxO1与Aven的启动子结合影响Treg细胞的凋亡。这些结果为进一步揭示调控Treg 增殖和免疫抑制活性的胞内机制提供了借鉴，也为与Treg细胞失衡相关疾病提供了新的药物靶标。本研究一部分结果已成文投稿并在修回中，另一部分结果正整理数据撰写论文中。