两端镶嵌纳米羟基磷灰石LARS韧带对成骨细胞Wnt/β-Catenin信号转导通路的影响及中药干预机制的研究

LARS-ligment is most popular tificial ligment in clinical use at present,but it is poor to merge with bone tunnel and get to be loose. As nanometer-hydroxyapatite can induce osteogenesis effects and epimedium can accelerate osteogenesis ,by the guide of the Zang theory of Chinese medicine,in the view of classical Wnt/β-Catenin signaling transduction，on the base of large clinic and experiment， we study the influence that LARS-ligment which implant nanometer-hydroxyapatite in ends to the norm which react conformation and development of osteoblast such as ALP、type I collagen 、OPG、Integrin-β1、osteocalcin、bone sialoprotein and so on and mechanism of herb which nourishing the kidney in this process ，which is carry out on osteoblast and model of anterior cruciate ligament (ACL)injury of goat using modern biology such as RNA interference technology, recombinant lentivirus technology, cell biology, molecularbiology .to provide new material (LARS-ligment which implant nanometer-hydroxyapatite in ends) for clinic use and new method of treating injury of ACL(increasing the fixed strength between ligement and bone using herb which nourishing the kidney in reconstruction of ligment ),while revealing the molecular mechanism of herb which nourishing the kidney in accelerating osteogenesis

LARS韧带是目前临床应用最为广泛的人工韧带，其两端与骨隧道愈合能力较弱，容易出现松动。纳米羟基磷灰石具有诱导成骨的作用，淫羊藿具有促进成骨的作用，本项目在大量临床和实验基础上，在"中医藏象理论"指导下，利用RNA干扰技术、重组慢病毒技术和细胞生物学、分子生物学等现代生物学研究方法，在人体成骨细胞及山羊前交叉韧带损伤模型上，从经典的Wnt/β-Catenin信号转导途径的角度，研究两端镶嵌纳米羟基磷灰石LARS韧带对ALP、Ⅰ型胶原、OPG、Integrin-β1、骨钙蛋白、骨涎蛋白等反应成骨细胞形成和发育重要指标的影响以及补肾中药在此过程中的调控机制。在揭示补肾中药促进成骨分子机制的同时，为临床交叉韧带损伤治疗提供新的材料（两端镶嵌纳米羟基磷灰石LARS韧带）以及新的治疗方法（利用人工韧带重建的同时应用补肾中药促进成骨，增加韧带与骨隧道的固定强度）。

LARS韧带是目前临床应用最为广泛的人工韧带，其两端与骨隧道愈合能力较弱，容易出现松动。纳米羟基磷灰石具有诱导成骨的作用，淫羊藿（ICA）具有促进成骨的作用，本项目在大量临床和实验基础上，在“中医藏象理论”指导下，利用现代生物学研究方法，在人体成骨细胞及山羊前交叉韧带损伤模型上，从经典的Wnt/β-Catenin信号转导途径的角度，研究两端镶嵌纳米羟基磷灰石及氯化锂LARS韧带对成骨细胞形成和发育的影响以及补肾中药在此过程中的调控机制。本实验发现，licl可提高成骨细胞自噬与骨分化，具有促进骨髓间充质干细胞增殖及定向诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化能力，可抑制破骨细胞骨吸收，通过提高Akt/mTOR信号通路中的Akt , mTOR磷酸化水平刺激成骨分化及ALP活力。Licl与ICA联合可提高成骨细胞和间充质干细胞的分化能力，及成骨细胞的矿化能力和活性，抑制GSK-3β的磷酸化及提高β-catenin 总蛋白的表达进而促进成骨细胞的增殖和分化 。为临床交叉韧带损伤治疗提供新的材料（两端镶嵌纳米羟基磷灰石LARS韧带）以及新的治疗方法（利用人工韧带重建的同时应用补肾中药促进成骨，增加韧带与骨隧道的固定强度）。