中国东北地区鸡源弓形虫基因分型与毒力的研究

Infection due to the protozoan parasite, Toxoplasma gondii, is widely prevalent in man and many species of warm-blooded animals (livestock and poultry) worldwide to cause zoonotic diseases. About 1/3 people are infected with Toxoplasma gondii in the world and the seroprevalence is up 5% to 20% in China. Toxoplasma gondii is transmitted by three major modes: congenitally, through the consumption of uncooked infected meat, and via feces of cats. At present, studies on infection with Toxoplasma gondii in chicken are still limited, so we should pay great attention to this research. On the basis of the appropriate conditions for scientific research, the aim of this study is to investigate the prevalence of toxoplasmosis in chicken in northeast China, and to isolate Toxoplasma gondii from chicken, cats and oocyst from soil to identify the genotype, then to find the reasons of infection with toxoplasmosis in chicken; meanwhile, we can study the genotype characteristics and virulence of Toxoplasma gondii isolated from chicken in northeast China. This study will expand the research scope of molecular genetics of toxoplasma gondii, make up for the lack of research about toxoplasmosis in chicken from China and provide new ideas; at the same time, this study will provide theoretical basis to prevent and control toxoplasmosis in chicken farms, strengthen the understanding of the harm to people from Toxoplasma gondii in chicken, and reduce the risk of infection with this parasite due to the consumption of uncooked infected meat.

弓形虫是专性细胞内寄生原虫，引起人兽共患弓形虫病，呈世界范围流行，是严重危害人类和家畜、家禽健康的重大寄生虫病。全球约有1/3的人口受感染，我国人群感染达5%～20%。人类感染弓形虫病的3个主要途径是垂直传播、食用未加工熟的感染有弓形虫的肉和接触环境中猫粪便中的卵囊。目前国内外关于鸡弓形虫病的研究尚少，所以针对鸡弓形虫病的研究需引起高度重视。本项目在已经具备相应科研条件基础上，旨在调查中国东北地区鸡弓形虫病流行情况，通过对鸡场中鸡源弓形虫、猫源弓形虫及土壤中弓形虫卵囊的分离与基因分型探讨出鸡弓形虫病流行原因，并在此基础上研究中国东北不同地区鸡源弓形虫的型别分布特点及毒力差异。本研究将扩大弓形虫分子遗传学的研究范围和弥补中国国内鸡弓形虫病研究的不足，为弓形虫学的研究提供新思路；同时为中国鸡的弓形虫病的预防和控制提供理论依据，加强社会对鸡弓形虫病危害的认识，降低人类因食用不熟鸡肉感染弓形虫的风

背景：弓形虫是专性细胞内寄生原虫，感染几乎所有的温血动物，包括人类、家养动物和野生动物等，呈世界范围流行，是严重危害人类和家畜、家禽健康的重大寄生虫病。全球约有1/3的人口受感染，我国人群感染达8%。人类感染弓形虫病的3个主要途径是食用未加工熟的感染有弓形虫的肉和接触环境中猫粪便中的卵囊，垂直传播。本项目旨在调查中国东北地区鸡弓形虫病流行感染情况，探究东北地区鸡源弓形虫基因型别分布特点及不同来源弓形虫虫株间的基因型关联。.材料和方法：（1）从辽宁和吉林共采集6947份鸡的血清（包括笼养鸡和散养鸡），其中辽宁地区笼养鸡2443份、散养鸡1372份，共3815份；吉林地区笼养鸡2091份，散养鸡1041份，共3132份；采用MAT方法检测血清抗体。（2）从农村共采集2743份溜达鸡的心脏和32份猫的心脏和舌头用于虫体分离实验。（3）采用目前国际公认的11位点（SAG1、(3’+5’)SAG2、alt.SAG2、SAG3、BTUB、GRA6、c22-8、c29-2、L358、PK1和Apico）PCR-RFLP技术，对不同来源的弓形虫虫株（鸡源弓形虫和猫源弓形虫）进行基因分型鉴定。.结果：（1）鸡弓形虫阳性率分别为辽宁18.72%和吉林12.45%；散养鸡阳性率为22.1%，笼养鸡为12.57%。（2）分离出鸡源弓形虫20株，猫源弓形虫8株。（3）鸡源弓形虫Tgchicken1-3，6，10,12-13,17-18,20为Chinese 1 （ ToxoDB#9 ），Tgchicken9为ToxoDB#1 （ type II），Tgchicken16为ToxoDB#225 ，Tgcat1-8为Chinese 1 （ToxoDB#9）。.结论：中国东北地区鸡普遍存在弓形虫感染，且感染率偏高。辽宁地区比吉林感染率高，可能气候寒冷不利于卵囊的孢子化；散养鸡感染率高于笼养鸡，说明散养鸡接触卵囊的机会较多。鸡源弓形虫和猫源弓形虫基因型存在一定的相关性，主要Chinese 1型，说明鸡弓形虫感染主要来源于猫的传播。.意义：本研究将扩大弓形虫分子遗传学的研究范围和弥补中国国内鸡弓形虫病研究的不足，为弓形虫学的研究提供新思路；同时为中国鸡的弓形虫病的预防和控制提供理论依据，加强社会对鸡弓形虫病危害的认识，降低人类因食用不熟鸡肉感染弓形虫的风险。