microRNA-155对口腔扁平苔藓Th细胞功能的调控机制研究

Oral lichen planus is T cell-mediated chronic inflammatory disease, Th cells are major effective cells.Our previous studies have found that miR-155 is overexpressed in peripheral blood of patients with oral lichen planus,however,the mechanism has not been elucidated.In this study,we intend to utilize slow virus vector,expression profile chip,microarray,flow cytometry, bioinformatics to explore the regulatory mechanism of miR-155 on Th cells in oral lichen planus in the following four aspects: (1)the function of miR - 155 on Th cells differentiation in the peripheral blood of oral lichen planus;(2) the function of miR-155 on Th cells differentiation in the local lesion of oral lichen planus; (3) the function of miR-155 on keratinocytes;(4) the network and key control factor in miR-155 regulating the development of OLP.

口腔扁平苔藓是T淋巴细胞介导的慢性炎性疾病，Th细胞是主要的效应细胞。本课题组前期研究发现，miR-155在口腔扁平苔藓患者外周血Th细胞中表达升高，但机制尚未阐明。本研究拟采用慢病毒载体、表达谱芯片、microarray、流式细胞术、生物信息学等技术和方法就miR-155对口腔扁平苔藓Th细胞功能的调控作用开展以下四方面研究：①miR-155 在OLP外周血中对Th细胞亚群分化的影响；②miR-155 在OLP病损局部组织中对Th细胞亚群分化的影响；③miR-155对OLP角质形成细胞的生物学效应；④miR-155在OLP发生发展中的调控信息网络和关键调控因子。研究对阐明microRNA-155在口腔扁平苔藓发病机制中的作用具有重要意义，并利用OLP作为观测模型，进一步阐明miR-155与人类黏膜免疫与疾病的关系，为寻找相关疾病的防治新靶点提供依据。

原计划书中拟研究 microRNA-155 对口腔扁平苔藓淋巴细胞的调控，由于实验技术及临床原因（口腔扁平苔藓病损黏膜中 Th 细胞数量较少，且传代、转染困难），实验遇到瓶颈，故在进行 10 例口腔扁平苔藓患者 Th 细胞提取、传代失败后，改为研究 microRNA-155 在口腔鳞癌发生发展中的作用机制研究。（已在2015-2017年度项目进展报告汇报）.口腔鳞状细胞癌是头颈部最常见的恶性肿瘤，发病机制不清，但研究多认为其发生和发展受原癌基因及抑癌基因的调控, 过程涉及DNA水平、转录水平、转录后水平及蛋白水平等多层面。MicroRNA作为一种在转录后水平对基因表达精细调控的非编码RNA，在OSCC发生发展中所发挥的作用越来越受到关注。MiRNA155作为一种重要的肿瘤相关microRNA分子，已证实与宫颈癌、胃癌密切相关，但其与口腔鳞癌发生发展中的相关机制研究仍为空白。本项目旨在研究microRNA155是否参与口腔鳞癌的发生发展，探讨miRNA155在口腔鳞癌发生发展的作用机制。.研究发现：1. miRNA155在口腔鳞癌细胞株中的异常表达（高分化、低分化的口腔鳞癌细胞miRNA155表达量明显升高，中分化的口腔鳞癌细胞的miRNA155表达量明显降低），提示miRNA155参与口腔鳞癌的发生发展。2. miRNA155过表达后，细胞生长受到促进，miRNA155低表达后，细胞生长受到抑制；miRNA155过表达，细胞粘附力升高，miRNA155低表达，细胞粘附力降低；miRNA155过表达，细胞迁移力降低，miRNA1 55低表达，细胞迁移力升高；miRNA155过表达，细胞侵袭力降低，miRNA155低表达，细胞侵袭力升高。4、肿瘤抑制蛋白APC、细胞周期调节蛋白WEE1、运动蛋白MYO10可能是MiR155 在口腔鳞状细胞癌中的下游蛋白。5. MiR-155过表达可通过IFN-γ和TNF-α作用，抑制口腔鳞癌细胞中PD-L1的表达。. 上述结果提示：miRNA155可能参与口腔鳞癌的发生和发展，且可能与PD-L1相关。