基于STIM/TRPC/SOCC通路探讨脾虚型FD大鼠胃动力障碍及香砂六君子汤干预机制

The pathogenesis of functional dyspepsia (FD) is mainly gastric dynamic obstacles, the stomach power is closely related to gastric smooth muscle contraction. Influx of extracellular calcium and the release of intracellular calcium are the determinant of smooth muscle cells (SMC) contraction, endoplasmic reticulum as intracellular calcium store, plays an important role in maintain intracellular Ca2+ concentration. As calcium store of Ca2+ released into cytoplasm, calcium store will appear the depletion of Ca2+, prompting to open the store operated calcium channel (SOCC) on the membrane,inducing influx of extracellular Ca2+ and refilling calcium store. Recently found that stromal interaction molecule (STIM) and Orai protein is the key to open SOCC, transient receptor potential canonical channel (TRPC) is the basic structure of SOCC. At home and abroad for STIM/TRPC/SOCC pathways in the role of FD gastric dynamic disorders, especially in the gastric smooth muscle contraction role has not been reported. This study is to explore the mechanism of FD with gastric dynamic obstacles from the STIM/TRPC/SOCC passway,based on composite factors stimulated rat model of FD .To explore its role in the mechanism of FD with gastric dynamic obstacle, and to explore Xiangshaliujunzi Decoction intervention effect on FD,furthermore,to clarify its mechanism of action for the treatment of FD by invigorating spleen and promoting power.

功能性消化不良（FD）的发病机制主要是胃动力障碍，胃动力与胃平滑肌的收缩密切相关。细胞外钙内流和内钙释放是平滑肌细胞（SMC）收缩的决定因素，内质网作为细胞内钙库，对维持细胞内Ca2+浓度具有重要作用。随着钙库中的Ca2+不断释放至胞质内，钙库会出现Ca2+耗竭，促使细胞膜上钙库操纵的钙通道（SOCC）开放，而引发胞外Ca2+内流，钙库重新充盈。近期发现，基质相互作用分子（STIM）和Orai蛋白是SOCC开放的关键蛋白，瞬时受体电位C通道（TRPC）是SOCC的基本结构。国内外针对STIM/TRPC/SOCC通路在FD胃动力障碍中的作用、尤其在参与胃平滑肌收缩所起的作用尚未见报道。本研究通过不同的复合因素制作FD大鼠模型，从STIM/TRPC/SOCC通路角度，探讨其在FD胃动力障碍机制中的作用，并探讨中药香砂六君子汤对FD的干预作用，明确其治疗FD健脾促动力的作用机制。

功能性消化不良(functional dyspepsia，FD)在不同人群中的患病率不同，西方国家患病率大约为20%～25%，国内为18%～45%，占消化门诊的20%～40%。该病缺乏特异有效的治疗方法，且其具有慢性、复发性和难以缓解性，严重影响患者生活质量。针对FD患者的治疗主要是抑酸药物，但是单纯使用胃酸抑制剂会产生诸多副作用，并且疗效会逐渐降低，香砂六君子具有疗效显著、价格低廉、无副作用特点，使用人群会更加广泛，还能够减少个人及社会经济负担，但是长期以来其作用机制尚不明确。FD的主要发病机制是胃动力障碍所致胃排空延长，胃动力与平滑肌收缩密切相关。Ca2+是触发平滑肌收缩的主要递质，是普遍存在的细胞内第二信使，调控细胞内Ca2+释放是调控平滑肌舒缩活动的有效途径，而细胞内Ca2+维持与内质网密切相关，因此本项目从STIM/TRPC/SOCC通路探讨脾虚型FD大鼠发病机制及香砂六君子作用机制。. 本项目首先采用碘乙酰胺灌胃叠加小平台站立建立脾虚型FD大鼠模型；其次明确胃中不同部位平滑肌群在胃排空中所承担的角色；最后采用免疫组化、Western-blot、RT-PCR和激光共聚焦检测了STIM/TRPC/SOCC相关蛋白和基因以及细胞内Ca2+。研究结果发现脾虚型FD大鼠模型具有胃动力障碍特征；胃体纵行肌和胃窦环行肌收缩幅度和收缩频率改变；胃组织Orai1蛋白和STIM mRNA低表达；TRPC6蛋白表达升高、TRPC1和TRPC2 mRNA表达量降低；CaM/MLCK/MLC蛋白和基因表达降低。香砂六君子对平滑肌肌条、相关蛋白和基因均有不同程度的调节作用。研究结论提示，香砂六君子提高脾虚型FD大鼠胃动力的作用机制可能是通过对胃体、胃窦平滑肌肌条收缩力和收缩周期频率的调节来实现。其具体分子机制可能是通过上调胃组织Orai1蛋白和STIM mRNA的表达量、降低TRPC6蛋白表达和提高TRPC1和TRPC2 mRNA的表达量来促进外钙内流补充内质网钙浓度；进一步提高CaM/MLCK/MLC蛋白和基因表达量，促进平滑肌收缩。本项目建立了FD大鼠模型，为后续中药复方作用机制研究提供了载体；初步阐明了健脾理气中药复方香砂六君子治疗FD健脾促动力作用机制，具有很好的科学意义；后续的新药开发将会具有更好的社会效益。