不同分子分型乳腺癌微环境浸润淋巴细胞的比较研究

The tumor microenvironment plays an important role in the progression of breast cancer, and tumor infiltrating lymphocytes (TILs) is one of its important components.In our preliminary studies, we have identified that TILs in different molecular subtypes of breast cancer have remarkable differences in their number, type, proportion and distribution.This project is going to expand the prior study to clinical analysis of large tissue samples and assessment of TILs in in-vitro tumor microenvironment. The comparative study is going to employ tissue microarray, flow cytometry, immunomagnetic bead cell separation, in vitro three-dimensional cell culture, real-time dynamic camera cell and ELISA, to assess the functional status and molecular mechanisms of TILs in different subtypes of breast cancer, to identify their relationship with clinico-pathological features, prognosis and treatment options, to look for predictors for prognosis and for immune therapeutic targets, especially for those subtypes that can not benefit from endocrine therapy and HER2/neu target therpay due to lack of hormone receptors and/or HER2/neu expression.

肿瘤微环境对肿瘤的演进和转归起重要作用，肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）是肿瘤微环境中的重要组成成分。我们的前期研究发现不同分子分型的乳腺癌微环境中TILs的数量、类型、比例及分布等均存在明显差异。本课题将进一步通过大样本临床数据分析以及体外模拟肿瘤微环境，对比研究不同分子亚型乳腺癌中的TILs，拟采用组织芯片、流式细胞技术、免疫磁珠细胞分离、体外三维立体细胞培养、实时动态细胞摄像、ELISA等方法，分析不同分子分型乳腺癌中TILs的功能状态和分子机制，分析其与临床病理学特征、预后及治疗的关系，寻找针对不同分子分型乳腺癌的预后预测和免疫治疗靶点，特别是为无法从激素受体或HER2/neu靶向治疗等乳腺癌重要的后续治疗中获益的分子亚型提供免疫靶标。

肿瘤微环境对肿瘤的演进和转归起重要作用，肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）是肿瘤微环境中的重要组成成分。我们在前期研究的基础上，对比不同分子分型乳腺癌微环境中TILs的差异，并进一步通过大样本临床数据分析验证该差异的临床意义及分子机制。研究结果发现：①不同分子分型乳腺癌微环境中TILs在数量、分布以及浸润淋巴的种类上均存在显著差异；②经细胞因子蛋白芯片对比分析120种细胞因子后筛选出12种差异显著的细胞因子行大样本临床验证，发现FOXP3、PD-L1、CCL22、CD168等在不同分型间差异显著，具有重要的临床预后意义，尤其在Basal-like型乳腺癌中发挥重要的免疫抑制功能；③分析发现TILs中FOXP3+ Tregs细胞与化疗反应、化疗耐药之间，以及代谢相关蛋白HIF-α、Caveolin-1、PKM2等与TILs、化疗反应及化疗耐药之间存在重要联系，揭示了TILs与乳腺癌尤其是Basal-like型乳腺癌患者化疗敏感性之间的重要关系；④对比发现同一分子亚型内，不同病理学类型乳腺癌免疫微环境状态仍然存在明显的异质性，因此对于某些特殊病理类型乳腺癌的免疫微环境及TILs特征应该分别进行研究，如对比分析化生性癌与Basal-like型乳腺癌之间，浸润性微乳头状癌、微乳头状粘液癌与Luminal型乳腺癌之间免疫微环境的区别与联系后，应将同一分子亚型进一步按照病理学分类细分和归类，结果便于临床应用。综上，这些重要的差异TILs和相关的免疫因子可能成为针对不同分子分型乳腺癌的预后预测和免疫治疗的靶点，特别是为目前无法从激素受体或HER2/neu靶向治疗等重要的乳腺癌后续治疗中获益的Basal-like型乳腺癌提供免疫靶标。