血管生成素样蛋白2对糖尿病肾病早期诊断价值及其机制研究

糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）作为糖尿病慢性微血管病变并发症，是糖尿病患者的主要死亡原因之一。目前缺少敏感、有效的早期诊断DN的手段。本项目在我们前期工作观察到血管生成素样蛋白（Angptl）2血清表达水平在早期DN患者中表达明显高于糖尿病无并发症患者及正常人，而后两者表达无差别的基础上，以本课题组国际首创的2型DN患者血清诊断决策树模型为平台，拟跟踪随访观察糖尿病无并发症患者血清Angptl2表达水平的自然进程与患者出现DN临床症状之间的时序关系，明确Angptl2作为早期DN血清诊断标记物的价值；体外细胞培养观察Angptl2对肾小球毛细血管内皮细胞及足细胞结构和功能的影响，动物实验观察2型糖尿病模型鼠血清、肾组织Angptl2动态表达水平与肾脏病理指标改变的关系，提供Angptl2作为早期DN血清诊断标记物的病理生理学依据。

糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）作为糖尿病慢性微血管病变并发症，是糖尿病患者的主要死亡原因之一。目前缺少敏感、有效的早期诊断DN的手段。本项目在我们前期工作基础上，发现血清Angptl2水平在早期DN患者中可能具有诊断提示价值：1、在早期DN患者中Angptl2表达水平明显高于早期糖尿病无并发症患者及正常对照者，而在后两组中Angptl2表达无差别。2、在糖尿病病程≤5年的人群中，DN患者血清Angptl2水平高于糖尿病对照患者，但尚未达到统计学差异，明显高于正常对照者，糖尿病患者也明显高于正常对照者，具有统计学差异。3、在糖尿病病史大于5年的人群当中，DN患者血清Angptl2水平与糖尿病对照患者表达相当，显著高于正常对照者，具有统计学差异。即DN患者血清Angptl2水平明显高于糖尿病无DN患者，明显高于正常人；在糖尿病无DN患者中随糖尿病病程延长而升高，与DN发生发展过程相符，由此我们认为血清Angptl2具有作为合格的早期DN血清诊断标记物的可能。进一步证实Angptl2在糖尿病肾脏损伤病理过程中发挥作用：1、肾脏免疫组化染色定位证实在GK大鼠肾脏中存在Angptl2广泛表达；2、细胞实验证实，随干预糖浓度的升高和时间的延长，小鼠肾小球内皮细胞株Angptl2 mRNA的表达水平有明显的增加；提示Angptl2参与了高糖对肾小球内皮细胞损伤的病理过程。对人肾小球系膜细胞分别给予高糖、高脂及高糖高脂联合刺激，无论高糖、高脂或高糖高脂联合组，其Angptl2 mRNA表达水平均较正常对照组明显升高。在蛋白表达水平上，高糖、高脂及高糖高脂联合刺激三组随作用时间延长，Angptl2蛋白水平均表达升高，其中以高糖高脂联合刺激组更为明显。提示Angptl2参与了高糖、高脂对肾小球系膜细胞损伤的病理过程。利用MTT法研究外源性Angptl2对系膜细胞增殖影响，发现高浓度 Angptl2 能显著促进肾小球系膜细胞的增殖。综上，我们目前认为在高糖、高脂等病理生理状态下，肾小球内皮细胞及系膜细胞分泌Angptl2增多，而高水平Angptl2亦可影响肾小球系膜细胞增殖，提示Angptl2参与了早期糖尿病肾脏损伤过程。这不仅在病理生理学范畴内为Angptl2作为早期DN血清诊断标记物打下坚实的理论事实依据，也为我们提供一个新的早期治疗DN的靶点可能。