地塞米松通过调控血管生成素样蛋白3治疗原发性肾病综合征的分子机制

It had never been well understood in the mechanism of glucocorticoids(GCs) treating with primary nephrotic syndrom(PNS).Recent study showed that GCs could improve the podocyte's function in pathologic condition. Angiopoietin like protein 3(ANGPTL3)has been reported as a key factor in lipid metablosim.Our study showed that kidney podocytes express ANGPTL3,except for liver cell.ANGPTL3 could be involved in podocyte actin rearrangement and proteinuria.And dexamethasone(Dex) could impact expression of ANGPTL3 in podocytes. This study is going to take the next steps:firstly,ANGPTL3' role in hyperlipidemia of PNS with human being,animal models and cultured cell lines;secondly,the ANGPTL3 which produced from liver cells is or not involved in expression of ANGPTL3 in kidney podocytes;thirdly, investigating the impact of Dex in ANGPTL3 expression from different tissues with animal model;Finally,the modulating mechanism of Dex in ANGPTL3 for puromycin induced-podocytes or liver cells.We hope find a new mechanism which Dex release the proteinuria and hyperlipidemia via modulating ANGPTL3 in PNS.

糖皮质激素（GCs）治疗原发性肾病综合征（PNS）的分子机制尚不清楚。有研究认为GCs能够直接改善病理状态下的足细胞功能。血管生成素样蛋白3（ANGPTL3）是最近发现的调节体内脂代谢的关键分子。我们前期研究证实，除肝脏外，肾脏足细胞也表达ANGPTL3，ANGPTL3可通过影响足细胞骨架重排参与蛋白尿的发生；地塞米松能够影响体外足细胞ANGPTL3的表达量。本课题在原有研究基础上：1.从患者、动物模型、体外细胞培养3个层面，探讨ANGPTL3是否参与了PNS高脂血症的发生；2.在明确ANGPTL3在小鼠肝细胞分泌后是否参与在足细胞的表达基础上；3.在动物模型中继续探讨地塞米松对PAN肾病小鼠不同组织ANGPTL3表达水平的调控特点4.进而在体外实验中，探讨地塞米松对PAN诱导的肝细胞及足细胞损伤中ANGPTL3的调控机制，以证实ANGPTL3是地塞米松改善PNS蛋白尿及高脂血症的新靶点。

背景：糖皮质激素（GCs）治疗原发性肾病综合征（PNS）的分子机制尚不清楚。本研究旨在探讨地塞米松是否通过调控血管生成素样蛋白3（angiopoietin protein like 3, ANGPTL3)表达，参与治疗PNS蛋白尿及高脂血症。主要研究内容包括：1、在肾病小鼠模型中探讨ANGPTL3是否参与了肾病综合症高脂血症的发生；2、在动物模型中探讨地塞米松对LPS肾病小鼠不同组织ANGPTL3表达水平的调控特点。主要研究结果和关键数据：1、采用CRISP/Cas9基因编辑技术，在国内外首次成功建立Angptl3基因敲除C57BL/6小鼠动物模型。2、我们研究发现，野生型小鼠给予LPS造模后24小时即开始出现肾病综合征表现，即甘油三酯、胆固醇升高，大量蛋白尿。但是Angptl3基因敲除小鼠给予同样剂量LPS造模后，高脂血症水平和蛋白尿水平均显著较野生型小鼠减轻，结果提示ANGPTL3是小鼠发生肾病高脂血症和大量蛋白尿的必要条件。通过病理学检查证实ANGPTL3通过影响足细胞足突融合参与肾病足细胞损伤的发生。提示，ANGPTL3缺乏能够缓解肾病肝细胞的脂代谢异常。3、地塞米松能够调控ANGPTL3在肝、肾组织的表达量，存而参与缓解肾病综合征的高脂血症和大量蛋白尿。本课题首先分析了给予地塞米松预处理的小鼠，再进行LPS造模，结果发现，与临床肾病治疗结果相似：地塞米松预处理组的蛋白尿及高脂血症程度得到明显缓解；足细胞的足突融合程度也得到明显改善。进一步分析地塞米松处理后对LPS肾病小鼠肝细胞及足细胞ANGPTL3表达量的可能影响。结果发现，地塞米松处理后小鼠肝脏及肾脏组织的ANGPTL3表达水平均发生显著下降。进而分析地塞米松是否会影响PAN肾病小鼠肝细胞及足细胞LXR的表达水平，结果发现：地塞米松能够显著影响LPS肾病小鼠ANGPTL3的表达水平。.科学意义：肾病综合征作为儿童最常见的肾脏疾病，探讨其发病机制对于发县更有价值的治疗药物具有非常重要的实际意义。我们的研究结果不仅发现了激素治疗肾病的新机制，而且为在西北地区开展新型基因编辑技术动物研究提供了实验基础。