转录因子NAC1通过调节FOXQ1介导上皮间质转化影响卵巢癌紫杉醇化疗耐药的作用及机制研究

Chemoresistance is one of the most important reasons that responsible for the high recurrence and poor prognosis of ovarian cancer. Recently, Epithelial-Mesenchymal Transition (EMT) has been concerned a lot because of its important function in regulating chemoresistance. Previously, we found transcription factor NAC1 was related to early recurrence of ovarian cancer; FOXQ1, which was well known of regulating EMT, was found to be one of NAC1’s downstream effectors. In this study, firstly, we will analysis the function of NAC1-FOXQ1 pathway in mediating paclitaxel resistance in ovarian cancer by using RNAi and gene overexpression methods in vivo and ex vivo; further more, we will explore the potential molecular mechanism of how NAC1 transcriptionally regulating FOXQ1 contributes to chemoresistance through EMT; finally, we will evaluate the possibility of NAC1、FOXQ1 and EMT relating factors acting as ovarian cancer prognosis markers. Thus, this project would be useful for further clarify the exact mechanisms of neoplasm chemoresistance and may provide new clues on ovarian cancer prevention and therapy. It should have important clinical values in improving patients prognosis.

化疗耐药是导致卵巢癌患者复发率高预后差的最主要原因，近年来上皮间质转化（EMT）在介导肿瘤化疗耐药中的作用受到广泛关注。我们前期研究发现转录因子NAC1高表达与卵巢癌早期复发密切相关， EMT重要调控因子FOXQ1是NAC1下游作用分子。本项目拟通过基因沉默及过表达技术，从细胞及动物实验水平全面验证NAC1-FOXQ1分子通路在卵巢癌紫杉醇化疗耐药过程中的作用；然后在分子水平阐述NAC1转录调控FOXQ1介导 EMT发生影响卵巢癌耐药的分子生物学机制；最后通过分析肿瘤组织中NAC1、FOXQ1及EMT相关分子表达，评估其独自或联合作为卵巢癌患者化疗耐药及预后分子标志物的潜在临床应用价值。该研究不仅有助于进一步揭示卵巢癌耐药的分子作用机理，而且有望为卵巢癌分子标志物及靶向治疗研究提供新的理论依据，对改善卵巢癌患者预后将起到积极作用，具有重要的临床应用价值。

化疗耐药是导致卵巢癌患者术后5年生存率低的重要原因，课题组前期研究表明转录因子FOXQ1在促进卵巢癌发生发展过程中有重要的生物学作用。本项目进一步研究发现FOXQ1在卵巢癌紫杉醇耐药细胞系中高表达，过表达FOXQ1介导卵巢癌紫杉醇耐药表型发生，提示FOXQ1是调节卵巢癌紫杉醇耐药的潜在分子；通过基因沉默及过表达技术，在细胞水平利用MTT和Western等方法确定FOXQ1在介导卵巢癌化疗耐药中发挥重要的生物学作用；利用荧光素酶法、Co-IP 及染色质免疫共沉淀 ChIP 等技术研究FOXQ1上游调控机制，发现与卵巢癌早期复发及化疗耐药密切相关的转录因子 NAC1 通过与BCL6结合形成转录复合物调控 FOXQ1启动子活性并影响其转录；研究FOXQ1下游调控卵巢癌化疗耐药的效应途径，通过transwell小室法检测发现 FOXQ1介导化疗耐药与 EMT 转化密切相关，FOXQ1在卵巢癌紫杉醇耐药细胞中影响EMT重要相关分子MMP7表达并调控卵巢癌细胞转移和侵袭；最后通过分析肿瘤组织中FOXQ1分子表达谱，利用生物信息学对卵巢癌组织芯片进行数据挖掘，发现FOXQ1在卵巢癌患者中高表达并与患者预后差显著相关。本课题研究表明FOXQ1可以作为预测和治疗卵巢癌化疗耐药的潜在分子靶标，为临床卵巢癌防治提供新的理论依据,具有一定的转化医学意义和应用价值。