PPARγ下调血管内皮细胞炎性因子HMGB1表达的分子机制及其抗炎生物学意义的研究

高迁移率族蛋白1（HMGB1）是导致血管内皮细胞炎症加剧的关键分子，因此抑制内皮细胞HMGB1的高表达对治疗多种炎性疾病具有重要的意义。本课题组前期研究发现核受体家族中的过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARγ）可显著下调血管内皮细胞中HMGB1的表达，但具体的机制不明。结合预实验和文献分析，我们提出PPARγ下调HMGB1表达的可能机制是：PPARγ通过影响UBCH5和NCoR与AP-1的结合，进而抑制AP-1在HMGB1启动子上的转录活性，最终导致HMGB1表达的下调。本项目拟采用点突变、siRNA、报告基因检测、免疫共沉淀、染色质免疫沉淀等方法深入解析该机制；然后在炎症小鼠模型上观察PPARγ对HMGB1表达的影响，从而揭示PPARγ-HMGB1通路的抗炎效果。该研究结果可为HMGB1致炎相关疾病的治疗提供有力的理论依据。

本课题在前期结果“PPARγ下调血管内皮细胞HMGB1表达”的基础上，进一步揭示HMGB1表达下调的分子机制。研究工作按计划进行。研究发现转录因子AP-1在其中的关键性作用，即PPARγ被配体活化后，可以促使AP-1的转录活性下降，进而使受AP-1调控的HMGB1基因的表达水平降低。..研究过程发现，HMGB1的转录抑制是受到多个转录因子共同作用的结果，而PPARγ被配体活化后抑制HMGB1的表达只是其中的一个环节，因为PPARγ需要其它因子的参与才能完成转录活性的完全释放，从而启动对HMGB1表达的抑制作用。目前，本研究发现，NCoR是一个调节PPARγ转录活性的重要辅抑制子，它在正常生理状态和炎性状态下，自身的修饰状态不同，因而具有不同的活性。由于PPARγ与NCoR存在空间上的相互作用，当NCoR的活性改变后，它会影响到与PPARγ的结合与解离，进而影响PPARγ的转录活性，最终使受AP-1直接调节的HMGB1的表达发生改变。 本研究工作开展顺利，按预期实验，完成了各个阶段的内容。