scFvCD20-9R负载AntagomiR155治疗EAMG的实验研究

本研究拟构建抗CD20单链抗体-寡9精氨酸（scFvCD20-9R）负载AntagomiR155，注入人类AChR免疫的HLA-DQ8转基因小鼠EAMG模型体内,利用B细胞表面标志分子CD20特异性单链抗体，介导AntagomiR155靶向性干扰B细胞Ig的产生及类别转换，在免疫反应的效应阶段抑制免疫应答。通过观察这些小鼠的临床特征、检测淋巴细胞的增殖反应、生发中心数目和B细胞亚群、血清中抗AChR抗体以及肌肉中AChR含量等免疫学指标，来鉴定scFvCD20-9R / AntagomiR155对EAMG的治疗作用。并观察模型中影响B淋巴细胞活化的重要因子BAFF及其受体介导的信号通路下游NIK、IKK- a、Bcl-2、Bcl-xl和TRAF3蛋白表达和磷酸化水平，从更深层次揭示这一方法对EAMG的治疗机制，为探寻特异性靶向B细胞治疗MG提供新的思路。

重症肌无力(Myasthenia gravis, MG)是一种由于神经肌肉接头处传递功能障碍而导致的、以骨骼肌易疲劳为特征的神经免疫性疾病，其中抗乙酰胆碱受体抗体(acetylcholine Receptor, AchR)的产生是MG发病的关键。miR155是一种新发现的微小RNA，最新的研究提示miR155可能参与了B淋巴细胞分泌抗AchR抗体的过程。本研究中，我们首先针对B细胞特异性表面标志CD20设计单链抗体(single chain fragment variant, scFv)，以该scFv为载体特异性干扰实验性自身免疫性重症肌无力（experimental autoimmune myasthenia gravis, EAMG）小鼠体内B细胞中miR155的表达，旨在探讨miR155参与MG发病的机制。在本研究中，我们发现miR155可能通过下调BAFF-R信号通路而参与B细胞抗AchR抗体的分泌，利用scFV-CD20可以成功抑制小鼠B细胞中miR155的表达，减少抗AchR特异性抗体的水平并显著改善EAMG小鼠的临床症状。我们的研究提示miR155有望成为治疗MG的新靶点。