糖皮质激素致应激性认知障碍的内质网应激机制

Due to the lack of specific indicators, the relationship between stress and the mental impairments is difficult to define in the forensic identification. It is an urgent problem to look for the objective markers to indicate the mental impairment induced by stress. Glucocorticoid concentration in plasma is often regarded as a reliable indicator of determination of stress, and it leads to hippocampal damage has been recognized by the glucocorticoid receptor. However, the underlying mechanisms are not fully understood. Studies have shown that neuronal apoptosis induced by stress is one of the important mechanisms of hippocampal atrophy and its damage. The endoplasmic reticulum is an important subcellular organelle and is susceptible to various stresses. Endoplasmic reticulum stress is considered an early or initial response of cells under stress or damage and linked to cell apoptosis. In the present study, we will examine the role of endoplasmic reticulum stress in the cognitive impairment induced by stress, through the rat restraint stress model in vivo and the primary cultured hippocampal neurons in vitro. It is also worth mentioning that, dissimilar to other stress responses, the mediators of endoplasmic reticulum stress are specific and well defined. Therefore, our study will provide important views in deeply understanding the relationship between stress and mental impairments. And it also will facilitate to solute a series of legal problems, such as the formulation of standard of compensation for mental damage.

在精神疾病司法鉴定实践中，常遇到一些应激后精神损伤的案件，由于缺乏科学、客观的判定标准，应激因素与精神损伤之间的关系难以界定，成为案件最终裁决的瓶颈。寻找应激致精神损伤的客观的判定指标成为法医学亟待解决的问题。糖皮质激素在血浆中的浓度被看作判定应激的可靠指标，其通过糖皮质激素受体导致海马损伤已得到公认，但具体机制尚不清楚。研究表明，应激时神经元凋亡增加是海马萎缩及其损伤的重要机制之一。内质网应激是应激时细胞的主要反应，是线粒体氧化应激等细胞应激反应的共同初始通路，可独立于其它途径直接诱导细胞凋亡。本课题拟通过整体动物束缚应激模型和体外原代培养海马神经元，探讨内质网应激在糖皮质激素致应激性认知障碍中所起的作用。由于反应细胞内质网应激及其凋亡的指标特异性强，易于检测，如果能够证明其作用，对判定应激因素与精神损伤之间的关系，对精神损害赔偿标准的制定等一系列法律问题的解决将提供一定的理论依据。

在精神疾病司法鉴定实践中，常遇到应激后精神损伤的案件，由于缺乏科学、客观的判定标准，应激因素与精神损伤之间的关系难以界定，成为案件最终裁决的瓶颈。寻找应激致精神损伤的客观的判定指标成为法医学亟待解决的问题。糖皮质激素在血浆中的浓度被看作判定应激的可靠指标，其通过糖皮质激素受体导致海马损伤已得到公认，但具体机制尚不清楚。研究表明，应激时神经元凋亡增加是海马萎缩及其损伤的重要机制。内质网应激（ERS）是应激时细胞的主要反应，可独立于其它途径直接诱导细胞凋亡。本课题通过整体动物束缚应激模型和体外原代培养海马神经元，探讨ERS在糖皮质激素致应激性认知障碍中所起的作用。.动物实验结果显示，与正常对照组相比，束缚应激后，大鼠血浆CRH和皮质酮浓度升高；海马神经元凋亡率增加，侧脑室注射糖皮质激素受体拮抗剂RU486，凋亡率降低；ERS标志分子GRP78、XBP-1、CHOP、Caspase12蛋白及mRNA表达升高，注射ERS抑制剂Salubrinal，表达降低；Caspase3、Bax/Bcl-2比值升高，应用Salubrinal后，表达降低；束缚大鼠认知功能降低，应用Salubrinal，认知功能有所改善。说明束缚应激时，糖皮质激素水平升高，ERS被激活，参与了海马神经元凋亡及认知功能减低的过程。.细胞实验结果显示，糖皮质激素CORT降低海马神经元存活率呈浓度和时间依赖性；CORT刺激后，LDH释放和TUNEL阳性细胞增加，加用RU486，凋亡减少；GRP78、CHOP、Caspase12蛋白及mRNA表达升高，加用RU486表达降低；PERK及p-eIF2a表达增加，RU486抑制了上述表达；神经元凋亡率增加，加用RU486或Salubrinal培养，凋亡率降低。说明在CORT诱导神经元凋亡的过程中，ERS被激活；PERK通路激活，诱导CHOP表达上调，可能是ERS诱导凋亡的重要途径之一。.上述部分实验结果发表在SCI杂志《Physiology & Behavior》和中文核心期刊《中国药理学通报》。.综上，我们发现，应激时，糖皮质激素升高，对海马神经元具有一定的损伤作用，ERS在其中发挥了重要作用。深入检测ERS及其凋亡的特异性指标，将为判定应激因素与精神损伤之间的关系提供理论依据和客观证据，对精神损害赔偿标准的制定起到一定的推动作用。