核酸适配子改构对青光眼术后抗瘢痕治疗的研究

Glaucoma is the second commonly encountered eye disease leading to blindness. Filtration surgery can effectively decrease the IOP by enhancing the drainage of aqueous material and is the principal treatment for glaucoma. However, the soaring occurrence of subconjunctival scarring that blocks the surgically created drainage channel limits the success rates of this surgery. TGF-beta plays an important role in the formation of conjunctival scar, blocking the TβR II can inhibit the TGF-beta induced fibrosis. In our previous study, we screened aptamers targeted against the extracellular domain of TβR II and derived a dominant sequencecalled aptamer S58 that antagonised TGF-beta-induced transdifferentiation of human Tenon’s capsule fibroblasts into myofibroblastsin. However，S58 has the shortcoming in stability and half-life. Three dimensional model construction tools have speculated the interaction residues site of S58 and protein. By the studying of this project, we plan to analysis the structure of S58 by Bioinformatics software. Through the analysis of the structure and the biological activity, find out the suitable shear site and explore the best blocking effect. Providing experimental basis of anti-scarring after glaucoma filtration surgery.

青光眼是世界上第二大致盲性眼病，手术降低眼压是主要治疗方法，但滤过术后结膜瘢痕形成是手术失败的主要原因之一。TGF-beta在结膜瘢痕形成中有重要作用，封阻TGF-betaⅡ型受体可以抑制TGF-beta致纤维化作用。我们采用SELEX技术筛选到靶向TGF-betaⅡ型受体的核酸适配子，并在体内、体外实验中证实适配子S58具有抑制成纤维细胞增殖的作用，但是S58存在稳定性不足、作用时间短等缺点，三维模建工具推测出S58与蛋白质氨基酸残基可能发生交互作用的残基位点。本项目拟在此基础上，我们将利用生物信息学软件，分析S58的二级结构，通过对其结构的分析，以及对位点进行生物学活性验证，从而找出适合的剪切位点，探索发挥最佳封闭效果的最短适配子序列。为降低组织纤维化的发生，提高抗青光眼滤过术的成功率提供实验依据。

青光眼是世界上第二大致盲性眼病，手术降低眼压是主要治疗方法，但滤过术后结膜瘢痕形成是手术失败的主要原因之一。TGF-beta在结膜瘢痕形成中有重要作用，封阻TGFbetaⅡ型受体可以抑制TGF-beta致纤维化作用。我们采用SELEX技术筛选到靶向TGF-betaⅡ型受体的核酸适配子，并在体内、体外实验中证实适配子S58具有抑制成纤维细胞增殖的作用，但是S58存在稳定性不足、作用时间短等缺点，我们利用生物信息学软件，分析S58的二级结构，通过对其结构的分析，以及对位点进行生物学活性验证，从而找出适合的剪切位点，在此基础上我们得到经过化学修饰的具有较强生物活性的核酸适配子C1-C4，D1-D4，并且通过实验验证相较于未修饰的核酸适配子S58，修饰后的适配子D1在抗纤维化表现方面，有一定提升。此外，通过研究，我们进一步验证了S58能够通过增加TGF-β2与TβR II结合位阻来抑制TGF-β2诱导的HConFs纤维化，并且认为S58可通过激活细胞内抗氧化防御PI3K/Akt/Nrf2信号通路改善青光眼滤过性手术术后结果。