甾体激素受体辅激活子-2在子宫内膜异位症孕酮抵抗中的作用研究

甾体激素受体辅激活子-2(SRC-2)是子宫孕激素受体激活靶基因转录必需的优势桥梁分子。我们在前期研究中发现，促炎性因子影响异位内膜的生物学活性。预实验发现，异位内膜中SRC-2表达显著低于正常和在位子宫内膜。针对子宫内膜异位症(EMS)患者对孕激素治疗的"孕酮抵抗"现象和盆腔液中存在的大量促炎性因子，本研究从基因和蛋白水平检测促炎性因子对异位内膜基质细胞表达SRC-2的影响；在细胞水平分别通过siRNA沉默SRC-2表达及慢病毒载体增强SRC-2表达，观察在不同的SRC-2水平下异位内膜基质细胞PR活性及细胞增殖水平的变化；在动物模型水平采用SRC-2慢病毒表达载体感染大鼠盆腔内异症病灶，从病灶的蜕膜样反应及生长变化检测在不同的SRC-2水平下病灶对孕酮的反应。探索SRC-2在异位内膜"孕酮抵抗"中所起的作用，为增强EMS患者对孕激素治疗的敏感性提供一个治疗靶点。

【摘要】 .目的 比较正常内膜和异位内膜组织中甾体激素受体辅激活子(SRC)和基质细胞衍生因子-1(SDF-1)的表达水平。了解SRC-1和SRC-2在甾体激素诱导正常和异位内膜基质细胞表达SDF-1中所起的作用。.方法 实时荧光定量PCR比较正常内膜和异位内膜在不同月经周期中SRC-1、SRC-2、SRC-3和SDF-1α mRNA表达水平。干扰RNA（siRNA）沉默正常和异位内膜基质细胞中SRC-1和SRC-2表达，ELISA和趋化实验检测雌二醇(E2)和孕酮(P4)诱导的SDF-1α表达和对单核细胞趋化能力的变化。慢病毒载体增加异位内膜基质细胞中丝裂原诱导基因-6(Mig-6)表达，蛋白电泳观察雌激素受体和孕激素受体表达水平，萤火虫荧光素酶报道系统检测受体生物学活性的变化。.结果 正常子宫内膜中SRC-1，SRC-2和SDF-1α的表达具有周期性变化，异位内膜缺乏周期性变化。分泌期异位内膜SRC-1和SDF-1α表达显著高于正常内膜。E2和P4共同刺激条件下，P4能有效拮抗E2诱导的正常和异位内膜基质细胞中SDF-1α表达（P＜0.05）。但在E2刺激后的72h和96h，P4在异位内膜基质细胞中的抑制率显著低于正常内膜基质细胞。沉默SRC-1表达可明显减少正常和异位内膜基质细胞中E2诱导的SDF-1α表达和对单核细胞的趋化能力。沉默SRC-2表达则显著降低了P4对E2的抑制能力。增强异位内膜基质细胞中Mig-6的表达能够增强孕激素受体表达及其活性。.结论 在甾体激素调控正常和异位内膜表达SDF-1α的作用中，SRC-1是雌激素的主要辅激活子，SRC-2是孕激素的主要辅激活子。增强异位内膜基质细胞中Mig-6的表达能够增强孕激素受体表达及其活性。