应用激光显微切割和液质联用技术进行中药组织化学研究

中药鉴定，包括药材的基原判定和品质评定，是保证中药安全有效的基础，也是开展中药研究的前提。性状鉴定和显微鉴定是主要的中药鉴定方法。两者具有简便易行、无污染、费用低等优点。然而,这两种鉴定方法均要求经验性，相对缺乏量化指标，急需与现代技术相结合，构建科学的、便捷的、普适的鉴定平台，以更好的继承并推广中药鉴定，保证中药安全有效。.本研究以祛风湿常用中药青风藤为对象，运用激光显微切割和液质联用技术分析其有效成分在药材显微组织及细胞中的分布，建立青风藤组织特征与有效成分的关系，从而探讨其有效成分的组织分布与动态积累规律，确立其性状、显微特征标准，为建立其他中药的性状、显微鉴定特征标准提供参考，为药材或饮片商品规格的划分提供科学依据，也为药材基原鉴定、品质评定以及安全有效性的判定提供快捷、可靠的新方法。

研究证实中药的外形、大小、颜色、质地、气味等性状特征与其所含的化学成分具有一定的联系，同时中药横断面的性状特征与内部组织构造的关系密切。本项目突破以往组织化学研究的方法，应用激光显微切割器准确分离中药的不同组织和细胞，并进一步采用超高效液质联用技术分析不同组织和细胞中的化学成分，从而准确获得有效成分在组织中分布的情况。立足于传统的中药经验鉴别，基于中药外形性状特征、显微组织结构与化学成分的相关性，应用激光显微切割与超高效液质联用技术，实现中药组织与特定细胞内微量成分的定性定量分析，建立中药性状特征与内在质量的相关性，从而科学阐明中药“辨状论质”的内涵。本项目研究将为依据性状特征评价中药的质量提供科学依据，并为阐明中药传统经验精髓提供新的思路和方法，从而更好地整理、继承和发扬传统经验。建立应用激光显微切割和液质联用技术进行中药组织化学研究的技术平台：以祛风湿常用中药青风藤为研究对象，首次应用激光显微切割与超高效液相色谱仪附超高解析质量精确度四极杆飞行时间质谱技术建立分析其有效成分在药材显微组织及细胞中的分布，建立青风藤组织特征与有效成分的关系，有关研究成果发表在国际杂志（Journal of Chromatography A. 2012, 1248: 93-103）。结果发现青藤碱等生物碱成分主要分布在木质部，从而建立中药青风藤直径较大者，其品质较佳。这个研究结论与我们收集不同外观特征的青风藤样品，测定青藤碱含量的结果一致 (Biological & Pharmaceutical Bulletin. 2005, 28: 105-109)，亦与此前应用基质辅助激光解吸电离质谱直接定位青风藤横切面中的化学成分分布的结果一致(Analytical Chemistry. 2007, 79: 2745-2755)。上述结果显示，本项目建立的技术平台，可以有效建立中药性状特征与内在质量的相关性。运用相似的方法，研究对中药草乌和附子中的毒性生物碱成分以及黄连生物碱、白芍化学成分在不同显微组织和细胞中的分布进行了分析。