急性淋巴细胞白血病中MicroRNA-29b介导NK细胞成熟障碍的研究

It has been concerned that the regulation of microRNA on natural killer (NK) cells in acute lymphoblastic leukemia (ALL). However, it has not been reported the research on phenomenon and the mechanism of NK cells maturation arrest in ALL. And we have not known whether miR-29b can promote NK cells maturation arrest in ALL. We have found that NK cells maturation arrest following the expression of miR-29b increase in ALL patients or ALL mice model. This indicated that the increased expression of miR-29b might regulate the maturation arrest of NK cells. This research would apply the experiment of ALL patients and ALL mice model to identify that the NK cells maturation arrest in vivo or in vitro. Furthermore, we apply miR-29b gene knockout mice to identify whether the increased expression of miR-29b regulate the maturation arrest of NK cells and survival time of leukemia. At last, we apply siRNA plasmid of transcription factor to identify whether miR-29b decreased IFN-r secretion by decreasing the expression of transcription factor T-bet or EOMES. The result would identify whether the phenomenon and the mechanism of miR-29b mediated NK cells maturation arrest. And this result would provide the new theory evidence for the leukemia treatment of the early and effective target to the individual immune deficiency.

急性淋巴细胞白血病中的MicroRNA对NK细胞的调控一直是受到关注的问题。目前没有报道关于miR-29b是否促使NK细胞成熟障碍的现象和机制的研究。我们已经发现在急性淋巴细胞白血病患者和小鼠模型中的NK细胞，随着miR-29b的表达升高，出现了NK细胞的成熟障碍，提示升高的miR-29b可能调控NK细胞的成熟障碍。本课题拟通过急性淋巴细胞白血病患者和小鼠的体内外实验，进一步明确NK细胞成熟障碍的现象；通过miR-29b基因敲除小鼠，探讨miR-29b的表达升高与NK细胞成熟障碍以及存活率的关系；通过转染转录因子的siRNA质粒，明确miR-29b是否通过下调转录因子T-bet或Eomes介导NK细胞的成熟障碍。实验结果将明确急性淋巴细胞白血病中miR-29b是否介导NK细胞的成熟障碍及其机制，为早期、有效的靶向个体的免疫缺陷治疗提供新的理论依据。

急性淋巴细胞白血病中的微小RNA(MicroRNA)对自然杀伤（NK）细胞的调控一直是受到关注的问题。目前没有报道关于在急性T淋巴细胞白血病中miR-29b是否促使NK细胞成熟障碍的现象和机制的研究。本研究发现：首先，在Notch1-T-ALL白血病小鼠体内成熟NK细胞亚群发生改变，NK细胞杀伤白血病细胞能力下降，分泌IFNγ 能力明显下降。促进NK细胞成熟的转录因子T-bet的表达下降。其次，miR-29b 基因敲除后能够部分恢复成熟NK细胞的CD27+CD11b+NK细胞亚群的比例，能够部分恢复NK细胞分泌IFNγ 的能力。能够部分恢复NK细胞中T-bet的表达。miR-29b 基因敲除能够降低白血病小鼠的白血病细胞的百分比，延长小鼠的生存时间。最后，白血病小鼠中miR-29b通过作用T-bet降低IFNγ的分泌。进一步在T-ALL白血病患者中，CD56brightCD16dim的NK细胞比例下降。miR-29b表达升高。IFN-γ的分泌能力下降。T-bet的表达水平下降。. 科学意义或应用前景：在Notch1-T-ALL急性淋巴细胞白血病小鼠和急性淋巴细胞白血病患者中，miR-29b的表达升高驱动着T-bet的改变，使NK细胞出现成熟障碍，表现为NK细胞亚群的改变以及分泌IFN-γ的NK细胞减少，最终使白血病细胞逃避NK细胞的杀伤。这些研究结果将揭示白血病微环境中NK细胞的成熟障碍及机制，为靶向此缺陷并且恢复NK细胞的正常功能，提高NK细胞的免疫监测能力，防治急性淋巴细胞白血病的发生和复发提供重要的依据。