基于"活性成分组合"研究藏荆芥治疗出血性中风相关物质基础

Tibetan medicine has the characteristics of multi-component, multi-channel, multi-target, and it belongs to the nonlinear complex system. Its pharmacodynamic effects are not based on an ingredient or a particular class of ingredients, but on the combinations of a variety of ingredients. Based on the distinctive characteristics of Tibetan medicine, using the method of "combinations of active ingredients ", the active separated components were screened. To find the best ratio combinations of active ingredients, using the method of data mining, their chemical and biological information were analyzed and predicted. Nepeta angustifolia C.Y.Wu is mainly used in the clinical treatment of hemorrhagic stroke. Based on the early study of chemical ingredients and pharmacological experiments, using the modern technologies of chromatography and spectroscopy, the components of Nepeta angustifolia C.Y.Wu were separated. The components were formulated into a combination of a certain proportion. Using the model of cerebral microvascula endothelial cells injured by hydrogen peroxide and the model of collagenase-induced experimental cerebral hemorrhage, the combinations were detected in vitro and in vivo. After analyzed the chemical and pharmacological data by the method of chemometrics, the combination of active ingredients in Nepeta angustifolia C.Y.Wu was screened step by step. Through the implementation of this subject, material basis of Nepeta angustifolia C.Y.Wu for treating hemorrhagic stroke is expected to find. It could provide an idea to study Tibetan medicine.

藏药具有多成分、多途径、多靶点协同作用的特点，属于非线性复杂体系，这说明其药效作用的基础并不是某个或某一类成分，而是多种成分的组合。本课题依据藏药这一鲜明特点，采用"活性成分组合"的方法对藏药进行研究，即将每次分离得到的组分配比进行活性筛选，采用数据挖掘的方法对其中所含的化学与生物学信息进行分析与预测，找到最佳配比组合后继续研究，直至找到"活性成分组合"。藏荆芥在临床上主要用于出血性中风的治疗，本课题组拟在前期化学成分与药理实验研究的基础上，采用现代色谱、光谱技术，对藏荆芥的化学成分进行分离，对分离所得的各组分进行配比组合，采用过氧化氢损伤大鼠脑微血管内皮细胞模型以及胶原酶诱导实验性大鼠脑出血模型，从体外和体内两方面进行检测，对化学和药理数据集进行化学计量学分析后，逐步筛选出"活性成分组合"。通过本课题的实施，有望发现反映藏荆芥功效特点的物质基础，还可为藏药的研究提供一种探索思路。

目前，对藏荆芥的研究较少，收载于《西藏自治区地方药材质量标准》中的藏荆芥质量标准仅对其性状、炮制、性味及功能主治等方面进行了阐述。对藏荆芥药理活性及化学成分的研究几乎处于空白状态，其在临床上的应用也仅限于传统处方，这严重阻碍了藏荆芥的进一步发展。为了系统的研究藏荆芥的化学物质及药理功效，课题组对藏荆芥的化学成分，抗炎、抗氧化和镇痛的药理活性，治疗脑出血模型大鼠脑水肿和脑血肿和对脐静脉内皮细胞的保护作用进行了研究。. 课题组对从藏荆芥中分离得到的化学成分经核磁色谱等进行鉴定，共确定10种化学成分，分别为齐墩果酸、白桦酸、熊果酸、β-谷甾醇、橙皮苷、异香柠檬烯、补骨脂酚、迷迭香酸甲酯、布卢门醇C葡糖苷、补骨脂素；三种抗氧化实验表明，藏荆芥石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇萃取层都具有不同大小的抗氧化作用，萃取物的抗氧化功效与样品浓度间具有较显著的量效关系；抗炎镇痛实验表明，藏荆芥不同溶剂萃取层提取物都具有不同程度的抗炎、镇痛作用，尤其是石油醚层、二氯甲烷层、乙酸乙酯层的效果最为明显；藏荆芥提取物可以明显减轻脑出血大鼠的神经行为学评分（P<0.05），藏荆芥大剂量组可以显著减轻脑水肿（P<0.05），但对血肿的清除并无明显作用，与模型组比较，藏荆芥使大鼠脑部AQP-4的表达显著降低以及NGF的表达明显增加(P<0.05)；藏荆芥通过抑制细胞质中IκB的降解与磷酸化，活化细胞质中的Nrf2，使其大量进入细胞核中并调控HO-1的相关基因，促进细胞大量表达HO-1，从而抑制由高浓度葡萄糖引起的细胞间黏附分子和ROS的表达。综上所述，藏荆芥具有出良好的抗炎镇痛和抗氧化的药理活性，因此能够减轻脑水肿，促进脑部损伤神经的修复，减轻高浓度葡萄糖产生的氧化应激对脐静脉内皮细胞造成的损伤，最终起到治疗出血性脑中风和预防内皮功能紊乱的作用，而齐墩果酸和熊果酸可能是其物质基础，为藏荆芥在临床上防治心脑血管疾病的应用提供理论基础。