基于“多靶点筛选-成分组整合”研究藏药罗堆多吉颗粒抗痛风物质基础与作用机制

Luo-Dui-Duo-Ji granules is the traditional formula for the treatment of gout in Tibetan medicine.The previous researches have demonstrated that Luo-Dui-Duo-Ji granules has anti-inflammation, analgesia effect. In addition, Luo-Dui-Duo-Ji granules with reducing the level of blood uric acid is beneficial for the cure of uric acid nephropathy. The research findings have been obtained the second scientific and technological progress prize of Tibet Autonomous Region. However, the fundamental researches with regard to Luo-Dui-Duo-Ji granules are limited. To work out this problem, we intend to further separate and purify the components of Luo-Dui-Duo-Ji granules with the help of ‘multi-targets screening and component groups integrating’ method and modern chromatographic techniques, spectroscopic techniques based on the results of preliminary study, and then screen and reveal the groups of active components by analyzing the data of several pharmacodynamics experiments with chemometrics method. In this way, we would deeply explore the mechanism of Luo-Dui-Duo-Ji granules for the treatment of gout in the terms of urate transportor and TLRs-NF-κB signaling pathway. Through this study, the material basis and mechanism for treating gout of Luo-Dui-Duo-Ji granules could be determined. After these researches, we could offer scientific evidence for the application and development of Luo-Dui-Duo-Ji granules, provide novel ideas and methods combined with characteristics and research status of compound preparation of Tibetan medicine, and lay the foundation for the modernization of Tibetan medicine.

罗堆多吉颗粒是藏医经验方，用于痛风的治疗，前期研究表明，其具有抗炎、镇痛和降低血尿酸作用，对尿酸性肾病具有治疗作用，本研究成果已获得西藏自治区科学技术成果二等奖，但本药的基础研究仍较薄弱。为解决这一问题，本课题拟在前期研究的基础上，对罗堆多吉颗粒应用“多靶点筛选-成分组整合”的方法，采用现代色谱、光谱技术，对其化学成分进行进一步的分离纯化，同时，结合多个的药效学试验数据，利用化学计量学的方法，通过数据挖掘，筛选、整合出“活性成分组”，在此基础上，从尿酸盐转运蛋白、TLRs-NF-κB信号通路角度，对该复方治疗痛风的作用机制进行较深入的探讨，从而确定罗堆多吉颗粒治疗痛风的物质基础与作用机制。通过本课题的研究，不仅可以为罗堆多吉颗粒的应用以及开发提供科学依据，还可以结合藏药复方的特点与研究现状，为藏药复方的研究拓展新思路及新方法，为藏医药的现代化奠定一定的基础。

罗堆多吉颗粒是是藏医经验方，用于痛风的治疗，前期研究表明，其具有抗炎、镇痛和降低血尿酸作用，但对该复方的基础研究较为薄弱，物质基础、作用机制以及方中重要药物的作用均未有深入研究。本项目在国家自然科学基金地区基金的资助下，根据组方特点，对复方中重要药物的化学成分进行了研究，采用LC-MS法分析藏党参（罗堆多吉）化学成分，共分析、鉴定20余种化合物，其中，有机酸、黄酮及萜类是其起药效作用的主要成分；从齿苞黄堇中分离得到4个化合物，其中，南天竹碱可作为质量控制指标。根据痛风疾病的治疗特点，对该复方及藏党参的抗氧化作用进行了研究，结果显示，罗堆多吉颗粒抗氧化部分多为中等极性部位，藏党参也具有较好的抗氧化性能。项目组还对该复方及重要组成药物藏党参、藏荆芥的降血尿酸、抗炎、抗痛风性关节炎等关键药效及其机制进行了研究，确证了君药藏党参降血尿酸作用与抑制肝脏XOD活性、有效恢复URAT1、GLUT9、OAT1、OAT3等尿酸转运体的表达水平有关；藏党参、藏荆芥的抗炎作用及机制研究发现，二者均能降低LPS诱导的体内外炎症模型的炎症因子水平，其作用与抑制NF-κB 通路的异常激活有关。在此基础上，进行了尿酸钠诱导小鼠急性痛风性关节炎模型实验，对于关节肿胀度、病理切片、氧化应激、炎症因子指标，罗堆多吉颗粒及藏党参均具有显著且明确的改善作用，而君药藏党参起着较为关键的作用。项目组还优化了本复方醇提水沉法的工艺参数，为本复方的制备和应用提供了实验依据。通过本课题的研究，明确了藏党参在本复方治疗痛风中的重要作用及其机制，同时，对齿苞黄堇、藏荆芥等方中重要药物的研究，也说明了本方组方的科学性和有效性。这些研究结果为本复方的临床应用提供了实验依据，也为藏药复方研究提供了方法与思路。