SNL大鼠脊髓NOX-•OH/ONOO- -p38通路致小胶质细胞活化分子机制

Spinal microglial activation induced by ROS plays a key role in neuropathic pain. The mechanisms of ROS production and microglial activation remain poorly understood. Our team have found that increases of hydroxyl and peroxynitrite in spinal microglia contribute to microglial activation in SNL rat; Reduced the levels of •OH and ONOO- in microglia, and inhibits microglial activation. The present study assumes that increasements of expression and activation of microglial NOX promote the productions of •OH and ONOO-, which activate p38 MAPK, and induce the activation of microglia, this is a new mechanism for neuropathic pain. We intend to use SNL rat as animal model, and BV-2 microglia as cell model. Our hypothesis will be proved in system-cell signalling pathway-cell angles. New entry points of •OH and ONOO- in present study may lay the foundation for reveal of mechanism of microglial activation, and provide a new idea for treatment of neuropathic pain.

活性氧（ROS）诱导脊髓背角小胶质细胞活化是神经病理性疼痛的重要机制，但我们对小胶质细胞内ROS的生成及ROS的作用仍知之甚少。我们前期工作揭示神经病理性疼痛大鼠脊髓小胶质细胞内•OH和ONOO-水平升高，伴有小胶质细胞活化，用自由基清除剂降低小胶质细胞•OH和ONOO-水平，可以逆转小胶质细胞活化。NADPH氧化酶（NOX）在小胶质细胞内生成ROS，且NOX与疼痛关系密切，但NOX与•OH和ONOO-关系仍不清楚。因此，本课题假设小胶质细胞NOX表达和活性增加，促使•OH和ONOO-水平升高激活p38MAPK，并诱导小胶质细胞活化，可能是神经病理性疼痛的新机制。我们拟用脊神经结扎模型和BV-2小胶质细胞模型，从整体-细胞信号通路-细胞层次证明我们的假设。本研究以•OH和ONOO-切入点为揭示小胶质细胞活化机制奠定基础，为治疗神经病理性疼痛提供新的潜在途径。

神经病理性疼痛脊髓痛敏机制十分复杂，在神经病理性疼痛动物模型的研究中，研究者发现脊髓背角神经元、胶质细胞都参与了脊髓痛敏过程，涉及的分子信号通路包括：炎症信号通路，神经递质、受体表达信号通路，活性氧信号通路。最近的研究表明氧化应激导致的小胶质细胞活化参与了神经病理性疼痛机制。本研究以大鼠脊神经结扎模型作为研究对象，重点关注动物模型脊髓背角小胶质细胞内活性氧的水平及小胶质细胞内p38MAPK信号通路活化情况。研究内容主要包括脊神经结扎前后不同时间点大鼠脊髓腰膨大NOX-2表达及活性变化，各个时间点•OH和ONNO-水平、磷酸化p38表达、小胶质细胞活化情况，氧化应激和内质网应激在脊髓背角抑制性中间神经元功能的影响，以确定NOX-2在神经病理性疼痛的发生发展过程中发挥的作用。并为研制新一代治疗神经病理性疼痛药物奠定基础。