民族药羊耳菊活性部位的体内过程及药动学-药效学相关性研究

Inula cappa is a common drugs for Guizhou Miao nationality,the dais in yunnan and other minority nationality. It has an unique remedy for the treatment of fever,sore throat and other symptoms.But there are some difficulties to the further develop such as the lack of effective substance study of Inula cappa.For this, our group had studied systematically on chemical constituents, pharmacological action and effective fraction of Inula cappa recently and obtained some achievements. This research will regard the whole elements of TMC as the starting point, analyze the composition in blood by fingerprint with UPLC-MS/MS, determination the intestinal permeability,characteristics of absorption and transportation of the main active ingredient of Inula cappa by organs and cellular level in vivo and vitro. Use MS and software of metabolite analysis to the studies of metabolism in vivo to determine the form and its metabolism fate and mechanism to component of Inula cappa. Establish PK-PD model to determine the Pharmacokinetics and Pharmacodynamics of Inula cappa to develop and validate the holistic pharmacokinetic properties of Inula cappa.Through the above studies, the effective substance of Inula cappa is elucidated and lay a theoretical and experimental foundation for mechanism of Inula cappa.

羊耳菊为贵州苗族及云南傣族等少数民族常用药物，常用于感冒发热，咽喉肿痛等症有独特疗效。但有关羊耳菊药效物质基础及体内过程研究尚属空白，已成为羊耳菊深层次开发利用的技术瓶颈。课题组对羊耳菊化学成分、药理作用、活性部位等进行了系统研究，并取得一定成果。本课题将在前期研究工作基础上，以色谱联用技术建立多维特征指纹图谱为基本手段，从在体、离体组织和细胞水平多角度研究羊耳菊主要活性成分的小肠通透性、吸收转运特性，揭示其吸收机制，同时进行体内代谢研究，以明确羊耳菊中各成分在体内的存在形式及其代谢途径，并建立PK-PD模型，结合药效学指标，探讨羊耳菊在体内的动力学过程和产生药理效应的相关性，揭示羊耳菊的药代动力学特征和体内直接作用物质，为阐明羊耳菊药效物质基础及作用机制提供科学依据。

羊耳菊为贵州苗族及云南傣族等少数民族常用药物，常用于感冒发热，咽喉肿痛等症，有独特疗效。但有关羊耳菊药效物质基础及体内过程研究尚属空白，已成为羊耳菊深层次开发利用的技术瓶颈。针对这一问题，本研究首先采用血浆药物化学实验结合代谢分析相关技术软件，明确羊耳菊活性部位可吸收入血的效应成分包括7个原型成分和16个代谢产物；并应用Caco-2细胞模型、离体外翻肠囊模型和在体肠灌流模型，从在体、离体组织器官和细胞水平多角度研究完成了羊耳菊主要活性成分的小肠通透性、吸收转运特性和转运蛋白调控作用，揭示了羊耳菊活性成分的吸收机制；应用UPLC-Q/TOF-MS对大鼠肠灌流液、胆汁、血浆、尿液、粪便及肠菌样品中代谢物结构进行快速分析，共检测分析112个代谢产物峰(含交叉成分)。代谢产物均以羊耳菊活性部位提取物中的咖啡酰基奎宁酸类成分的代谢产物为主，黄酮类成分的代谢产物较少。体内代谢产物主要以咖啡酰基奎宁酸异构化、甲基化、葡萄糖醛酸化以及复合反应为主，体外肠道菌群中，主要以咖啡酰基奎宁酸水解，甲基化代谢以及复合反应为主；采用Cocktail探针药物法考察羊耳菊提取物对肝微粒体中CYP450酶活性的影响，结果发现其对人和大鼠肝微粒体中6种亚型酶活性的抑制作用非常弱；采用灌胃和静脉注射两种给药方式探讨了羊耳菊主要活性成分在大鼠体内的ADME 变化规律及生物利用度情况，结果表明羊耳菊提取物主要活性成分在大鼠体内的绝对生物利用度在6.93%-13.56%之间；通过建立炎症模型，阐明了羊耳菊主要活性成分在疾病状态下的药代动力学特征，并建立了羊耳菊多个成分的药动学-药效学（PK-PD）结合模型，探讨了羊耳菊在体内的动力学过程和产生药理效应的相关性。最后，采用HPLC法建立了与药效相关的多活性指标成分分析的羊耳菊质量控制新方法。总之，本项目的研究结果为羊耳菊深层开发利用奠定了理论和试验基础。