基于体内过程的苗药红禾麻药效物质基础研究

Laportea bulbifera (Sieb.etZucc.) Wedd. , as a medicine herb, is commonly used by Miao nationality in Guizhou for the treatment of rheumatism, traumatic injury and other symptoms. However, the further research and development of the herb has come to the bottleneck because of the lack of its fundamental research in pharmacodynamics substances and the ADME. Based on the previous systematic research of chemical constituents, pharmacological action and efficient components, the project will focus on the constituents migrating into the blood by serum medicinal chemistry and the fingerprint of UPLC/Q-TOF MS. Furthermore, the potential correlation between these constituents and pharmacological action will be put into study to explore the anti-inflammation constituents , using cell inflammatory models and spectrum-activity analysis. Thereafter, the serial research will be conducted on ADME and anti-inflammation activity by PK markers so as to build the PK-PD model which may demonstrate the action between the multicomponents and the pharmacological activities. Through the metabolism fate study in vivo, on the other hand, it can be make clear how the medicinal materials in Laportea bulbifera exist and are processed. All these help find out the therapeutic material basis in the herb to lay a theoretical and experimental foundation for deeper development and application of the medicinal plant.

红禾麻为贵州苗族常用药物，对于风湿麻木、跌打损伤等症有独特疗效。但有关红禾麻药效物质基础及体内过程研究尚属空白，已成为红禾麻深层次开发利用的技术瓶颈。本课题将在红禾麻化学成分、药理作用、有效组分研究等前期工作基础上，从红禾麻体内直接作用物质出发，以UPLC/Q-TOF MS技术建立指纹图谱，全面分析红禾麻入血成分，基于细胞炎症模型探讨体内移行成分与抗炎活性的相关性；在此基础上开展红禾麻在炎症疾病动物模型下的药代动力学和抗炎作用相关性研究，建立PK-PD模型，探讨红禾麻多效应成分在体内的动力学过程和产生药理效应的动态变化过程即药物浓度-时间-效应关系；并通过体内代谢研究，明确红禾麻中各成分在体内的存在形式及其代谢途径，最终揭示红禾麻抗炎作用的物质基础，为其资源深层次开发利用奠定理论和试验基础。

苗药红禾麻对于风湿麻木、跌打损伤等症有独特疗效。但有关红禾麻药效物质基础及体内过程研究尚属空白，严重制约对其深层次开发利用。本项目对红禾麻提取物中化学成分分析，共鉴定13个化学成分，其中新绿原酸、隐绿原酸、绿原酸、芦丁、异槲皮苷、木犀草苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷、紫云英苷和槲皮苷均首次在该植物中发现。红禾麻含药血清能够有效抑制TNF-α活化的MH7A细胞增殖并显著降低炎症因子前列腺素E2（PGE2）、白细胞介素-6（IL-6）及白细胞介素-1β（IL-1β）的分泌，具有治疗类风湿性关节炎的作用。30个体内移行成分在红禾麻含药血清中被检测到，其中有8个成分（新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、芦丁、异槲皮苷、木犀草苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷、槲皮苷）被确定是以原型入血，谱效关系分析显示，其中有12个特征峰与药效有显著关联。在大鼠体内和肠道菌群共检出135个代谢产物峰，其中粪便、尿液、胆汁分别有43、36、25个代谢产物（含交叉成分），在大鼠及人肠道菌液中分别检出23、25个代谢物峰。红禾麻提取物可诱导CYP2C19、CYP3A4、CYP2D6的活性，抑制CYP1A2、CYP2E1的活性，不影响CYP2C9的活性。基于Caco-2细胞模型、大鼠肠外翻模型和大鼠肠灌流模型研究红禾麻提取物活性成分的吸收特点和吸收机制，并发现AA的病理状态能够影响其吸收和单次及多次给药的药代动力学过程。在此基础上，结合各药效指标的动态变化规律，建立了红禾麻PK-PD结合模型，量化了红禾麻活性部位中各入血成分的PK与PD之间的关联，阐明了红禾麻发挥抗关节炎的作用可能与降低AA大鼠血浆中TNF-α、INF-γ、IL-1β、RF的含量及增加TGF-β1的含量有关，且TNF-α可能为最直接的作用靶点。最后，结合红禾麻入血成分及药材中含量较高的化合物，成功建立了同时测定这10个成分的多指标质量控制方法。同时测定了12批次红禾麻药材的指纹图谱并建立了共有模式，标定共有峰20个，12批次红禾麻药材指纹图谱相似度为0.805~0.931。研究结果为红禾麻药材的资源深层次开发利用奠定了一定的理论和试验基础。