高原低氧对药物代谢酶P450和NAT2活性及表达的影响研究

在高原低氧特殊环境中，药物体内代谢发生一定变化，而酶是影响药物代谢的主要因素之一，高原低氧能否影响药物代谢酶的活性和表达值得进一步去探讨。.项目利用青藏高原独特的地理条件，以P450主要同工酶CYP1A2、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4及NAT2为研究对象，将大鼠分为平原对照组、急性缺氧组和慢性缺氧组，重点研究：①采用HPLC法测定各组大鼠尿液中的探针药物及其代谢产物，评价五种代谢酶活性的变化；②采用Western blot和实时定量PCR分别测定各组大鼠肝脏中五种酶的蛋白和基因表达，分析高原低氧对五种酶表达的影响；③采用ELISA方法测定各组大鼠血清中HIF-1α、IL-1β、EPO和IFN-γ等调节因子的变化，分析这些调节因子与五种酶活性和表达之间的相关性。.期望能为今后高原低氧环境中研究药物代谢起一定指导作用，并对高原地区临床合理用药提供一些有价值的依据。

项目主要研究了高原急、慢性缺氧对药物代谢酶P450和NAT2活性及蛋白和基因表达的影响。实验动物大鼠分为平原组、中度海拔急性和慢性缺氧组、高海拔急性和慢性缺氧组共五组。 采用探针药物评价酶的活性，探针药物及代谢产物的血药或尿药浓度均采用RP-HPLC测定。采用ELISA测定CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6, CYP2E1, CYP3A1 和 NAT2的蛋白表达，采用实时定量 PCR测定CYP1A2, CYP2D6, CYP2E1, CYP3A1 and NAT2的基因表达。. 研究结果表明，在高原低氧环境中，药物代谢酶P450和NAT2的活性、蛋白和基因表达发生显著变化。与平原组比较，高原急、慢性缺氧使CYP1A2的活性、蛋白和基因表达均显著降低，CYP2C9活性和蛋白表达无显著变化，CYP2C19的蛋白表达无显著变化，但活性显著升高。与平原组比较，高海拔慢性缺氧使CYP2D6的活性和基因表达均显著升高，中度海拔急性缺氧使NAT2的活性和基因表达均显著降低。与平原组比较，高海拔慢性缺氧使CYP2E1的蛋白和基因表达显著降低，中度海拔和高海拔慢性缺氧使CYP3A1的蛋白和基因表达均显著降低。. 采用ELISA测定各组大鼠血液调节因子的变化。与平原相比，高海拔慢性缺氧使大鼠HIF-1α、IL-1β和EPO均显著升高，中度海拔慢性缺氧和高海拔慢性缺氧使大鼠IFN-γ均显著升高。相关性分析表明，血液调节因子EPO、HIF -1α和IL -1β与部分酶活性、蛋白和基因表达之间具有相关性。. 项目为高原低氧环境中研究药物代谢起一定指导作用，并对高原地区临床合理用药提供了一些有价值的依据。