细胞内吞与靶向性抗肿瘤融合蛋白功能相关性的分子机制研究

前期动物实验证实，重组融合蛋白EGF-E4orf4可以靶向性作用于EGFR高表达的肿瘤细胞，抑制肿瘤增殖，并显示了较好的安全性。鉴于细胞内吞作用和膜的转运可以参与介导细胞程序性死亡，其中很多复杂的机制目前尚未揭示。本课题将以EGF-E4orf4为模型，用化学抑制剂和负显性突变体干扰细胞内吞途径，研究融合蛋白经EGFR介导的内吞过程是否同时存在非笼型蛋白介导的内吞途径；用活细胞工作站结合激光共聚焦显微镜观察融合蛋白在胞内转运和代谢途径，研究Rab家族蛋白对融合蛋白转运的调节机制；观察干扰细胞内吞作用后对受体信号传导和细胞增殖的影响；从RNA及蛋白水平、细胞定位、细胞增殖等验证抑癌基因Bin1是否可以作为E4orf4蛋白调控的新靶点。本课题重要性在于为靶向性抗肿瘤融合蛋白抑制肿瘤细胞生长的胞内途径及分子机制提供更多的可信依据，有助于进一步阐述内吞作用介导外源性抗肿瘤生物制剂发挥作用的分子机理。