可溶性表氧化物水解酶在肾小管上皮间充质转化及炎细胞浸润中的作用及机制

Renal tubulointerstitial fibrosis(TIF) is often regarded as the final outcome of a wide range of chronic kidney disease progressed to ESRD. The pathogenesis of TIF is characterized by inflammatory cell infiltration, EMT and so on.Epoxyeicosatrienoic acid is a metabolite of arachidonic acid, have a variety of biological protective effect, degradated by soluble Table oxide hydrolase (sEH), thus in sEH involved in variety pathophysiological process, such as hypertensition and inflammation.The role of sEH in hypertensive renal damage has been widespread concern. According to our preliminary results, sEH was involved in proteinuria induced tubular injury by promoting tubular EMT and infiltration of inflammatory cells. Meanwhile, we found that TGF-β promote the expression of sEH and sEH inhibitors can reduce the role of TGF-β. In this study, we studied the role of sEH in TIF in a UUO model in vivo and exposure of TGF-β in vitro by sEH gene knockout mice, sEH inhibitors or sEH adenovirus. Research in TGF-β-Smad or TGF-β-PI3K -Akt mediated EMT and expression of NF-kB mediated inflammatory cytokines, conduct a study to explore the mechanism of sEH in TIF. The findings may provide new experimental data, for delaying kidney disease progress, and provide new ideas for clinical treatment.

肾小管间质纤维化是多种病因所致慢性肾脏病进展至终末期肾病的共同通路，其中肾小管上皮间充质转化（EMT）和炎细胞浸润为其始动因素。环氧二十碳三烯酸是花生四烯酸代谢产物，具有多种生物学保护作用，主要表达在肾脏和心血管系统,被可溶性表氧化物水解酶（sEH）降解。我们前期发现sEH通过促进肾小管EMT及炎细胞浸润参与了蛋白尿肾小管损害，近端肾小管上皮细胞中TGF-β促进sEH表达,sEH抑制剂能够减轻TGF-β作用。据此推测sEH可能通过TGF-β参与了肾间质纤维化的形成。本研究拟利用sEH基因敲除小鼠制作单侧输尿管梗阻模型，同时体外给予肾小管上皮细胞sEH抑制剂、sEH腺病毒，通过分析TGF-β-Smad或TGF-β-PI3K/Akt介导的EMT及NF-kB介导的下游炎症因子表达的变化，阐明sEH在肾小管间质纤维化中的作用机制，从而为延缓慢性肾脏病进展提供新思路。

肾小管间质纤维化是慢性肾脏病（CKD）进展的共同病理阶段，也是进展至终末期肾病的必经阶段。环氧二十碳三烯酸（EETs）是花生四烯酸经CYP450表氧化物酶代谢的产物，可溶性表氧化物水解酶（sEH）可以水解EETs形成对应的脱氢产物（DHETs），从而降低或失去其生物学活性。sEH抑制剂可抑制sEH活性，减少EET的降解，维持EET在血液和组织中的浓度，发挥其降血压、抗炎性反应、利尿利钠、促进纤溶、促血管生成、调节内皮功能重要的生物学效应。本研究利用IgA肾病肾穿刺标本，通过离体肾小管上皮细胞及巨噬细胞的培养，在体肾脏纤维化动物模型，探索sEH抑制剂的保护作用及其机制。穿刺标本sEH免疫组化结果可见，肾小管sEH表达与尿蛋白排泄及肾间质炎症细胞浸润呈正相关。离体及在体实验中，sEH抑制剂可通过抑制sEH活性，增加肾组织EET含量，减少肾小管上皮细胞炎症因子释放；通过抑制巨噬细胞的NF-κB通路，激活PI3K通路，参与巨噬细胞M1向M2的转化，促进肾组织修复；通过调节细胞周期，抑制促纤维化因子的释放，发挥抗纤维化作用。我们首次发现sEH抑制剂参与巨噬细胞极化及调节肾小管上皮细胞周期作用，具体机制有待进一步研究。上述发现不仅为慢性肾脏病的治疗提供新的干预靶点，也为深入探讨EET的生理学作用提供了实验基础。