清肝益气降压方对自发性高血压大鼠血管重构的分子机制研究及基因芯片探查

肝火耗气是原发性高血压初期的重要病机。通过研究清肝益气降压方的降压机制，揭示清肝益气法是干预原发性高血压病情发展与转归的重要治法。根据名老中医临床治疗经验，结合现代临床对本病研究进展，确定体现该治法的药物组成方剂-清肝益气降压方。在自发性高血压大鼠（SHR）模型上进行血管重构分子机制研究；并通过拆方分析，对清肝益气方中益气、清肝及清肝益气的不同配伍组合的作用机理进行分析，以阐明新治法的构成机理及各配伍组合对原发性高血压病的降压机制。 另一方面，运用基因芯片技术对自发性高血压大鼠下丘脑、主动脉、肾进行全基因探查，以寻找原发性高血压病差异基因表达谱，从分子层面揭示本方的降压机制。

本课题采用国际通用自发性高血压大鼠病理模型（SHR）灌胃给药，观察清肝益气降压方及其拆方组的降压作用；检测内皮素（ET）、一氧化氮（NO）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、肿瘤坏死因子（TNFa）等指标。通过对SHR的心、肾、胸主动脉常规切片，HE染色，用光学显微镜观察，并用AO---多功能显微镜拍照，观察对心、肾、胸主动脉组织形态学的影响。结果显示：清肝益气降压方有确切的降压作用，给药前后相比血压明显下降(P<0.05) ，结果优于各拆方组；能够提高NO水平并调整ET/N0的平衡，调控血管舒缩、降低血管张力；降低血浆AngⅡ浓度和血清TNFa的作用，具有良好的逆转SHR血管、心、肾损害的作用。结论：本方具有良好的降压作用，黄芪与清肝、养阴、疏肝药物配伍后，可以增强其对SHR的降压作用。且在全方提高SHR血清N0的作用中，黄芪有明显的配伍增效作用。. 通过对SHR肾常规切片进行HE染色和Masson染色，用光学显微镜观察本方对SHR肾内小动脉组织形态学的影响。运用免疫组化技术和原位杂交技术，观察本方对SHR肾内小动脉内皮型一氧化氮合酶基因和血管紧张素Ⅱ1型受体基因表达的影响，结果显示本方能预防SHR血管纤维化。. 清肝益气降压方对自发性高血压大鼠心全基因表达谱影响的研究，结果显示模型组与正常组比较有398条基因差异表达，其中上调基因207条，下调基因191条；阳性组与正常组比较有1289条基因差异表达，其中上调基因664条，下调基因625条；清肝益气组与正常组比较有1199条基因差异表达，其中上调基因675条，下调基因524条。其基因功能涉及代谢过程、催化活性、免疫反应功能、磷酸盐运输功能、应激应答功能、应答生物刺激等功能。. 本课题按项目计划顺利完成。