基于农杆菌介导的雷公藤次生代谢物形成与调控机理研究

通过发根农杆菌介导对药用植物雷公藤进行发根转化体系建立，探讨发根农杆菌对雷公藤次生代谢物形成的影响；在筛选高产株系的的基础上进行悬浮培养条件（培养基、光周期、温度及转速等）优化，分析外源激素、诱导子（生物与非生物等）、前体饲喂、代谢抑制等调控因素及其组合对雷公藤毛状根的产量及其次生代谢物的影响机制，确立稳定而具有高活力的雷公藤次生代谢物的毛状根悬浮培养系统，并进行放大培养条件的研究，从而为雷公藤毛状根合成次生代谢产物奠定理论基础。

本项目以药用植物雷公藤为对象，对其进行发根转化及雷公藤甲素生成的相关调控优化研究。结果表明：在外源激素NAA存在条件下，农杆菌10544菌株对雷公藤叶外植体的发根率最高；不同类型诱导子水杨酸，氯化镧，NS-5及NS-17在合适浓度下均能有效促进雷公藤毛状根甲素的积累；而外源激素3-吲哚乙酸，前体物异戊烯焦磷酸及三萜合成抑制剂松油醇的添加也能明显增加雷公藤毛状根培养体系中雷公藤甲素的生成浓度。