基于HPLC-ESIMS/MSn技术对傣百解中C21甾体类成分的多样性及生物活性研究

As one of four famous ethical medicines, Dai medicine possessing a long history and definite clinical effect is thought to be important source of new drug. Dregea sinensis Hemsl is well known in Dai ethnic minorities with detoxification, defervesce, detumescence and acesodyne. Various studies had proved that C21 steroidal glycosides were the main constituents and showed siginificant immunoloregulation and antitumor bioactivities. However, it was hard work to obtain C21 steroidal glycosides by common chromatographic methods due to their low content, complex structure and similar chemical property. In order to deeply research this plant HPLC-ESIMS/MSn technique will be used to study structural characters of C21 steroids on the basis of ESIMS/MSn fragmentation patterns of C21 steroidal glycosides。Furthermore, the bioactivities of pure compounds and mixture will be checked. Then the results not only are useful to discuss the relationship of structures and bioactivities, but also an important material foundation and theory support for the development of D. sinensis Hemsl as new drug.

民族药物是发现新药的重要源泉。傣药作为我国四大民族药物之一，具有悠久的历史和广泛的临床疗效。项目选择的傣百解是傣药中著名的单味药，具有清火解毒、消肿止痛的功效。前期研究发现傣百解中所含有的C21甾体类成分不仅是其中的主要结构类型，更具有较好的免疫调节和抑制肿瘤细胞作用。然而，C21甾体类成分常因含量少，极性较大、结构相似而难于分离和结构鉴定，应用常规的色谱方法很难将其分离，从而限制了对傣百解的深入研究和开发利用。项目以傣百解中化学成分的分离与结构鉴定为基础，通过分析C21甾体类成分的ESIMS/MSn裂解途径和规律，利用HPLC-ESIMS/MSn在线技术对傣百解中微量、复杂的C21甾体类成分进行分析和鉴定，以及进一步的单体成分和混合组分生物活性评价，为傣百解新药开发提供重要的物质基础和理论支持。

民族药物是发现新药的重要源泉。傣药作为我国四大民族药物之一，具有悠久的历史和广泛的临床疗效。项目选择的傣百解是傣药中著名的单味药，具有清火解毒、消肿止痛的功效。前期研究发现傣百解中所含有的C21甾体类成分不仅是其中的主要结构类型，更具有较好的免疫调节和抑制肿瘤细胞作用。然而，C21甾体类成分常因含量少，极性较大、结构相似而难于分离和结构鉴定，应用常规的色谱方法很难将其分离，从而限制了对傣百解的深入研究和开发利用。项目以傣百解中C21甾体类成分的分离与结构鉴定为基础，通过分析该类化合物的ESI-MSn裂解规律，建立HPLC-ESI-MSn方法；对混合组分中C21甾体类成分进行深入研究，从中分析鉴定了127个微量的C21甾体类成分；建立C21甾体化合物数据库和相关蛋白分子库；采用计算机模拟分子对接，筛选出8个与IL-2Rα、TNF-α和TLR4分子结合，且具有潜在活性的C21甾体分子；通过表面等离子体共振，CDOCKER分析，以及部分单体化合物进行体外生物活性评价。项目的研究结果为傣百解新药开发和临床作用机制研究提供重要的物质基础和理论支持。项目中HPLC-ESI-MSn方法的建立，对天然药物中微量成分的研究具有重要的参考价值。