思茅藤C21甾体抗骨质疏松活性研究

思茅藤（Epigynum auritum）产于云南南部。我们曾从中分离到D-环插氧的新类型C21甾体Epigynumgenane，研究成果发表于Tetrahedron并被国际著名生物有机评述杂志Natural Product Report评为2005年研究热点之一，但其药效学研究迄今未见报道。最近，我们的研究显示Epigynumgenan具有碳酸酐酶 II抑制作用（IC50 4.17g/ml）,碳酸酐酶II与破骨细胞调节的骨吸收有密切关系,因此寻找碳酸酐酶 II抑制剂将会发现新的骨质疏松症治疗药物。本课题拟针对思茅藤中C21甾体类化合物进行分离及结构修饰和改造，在受体和酶水平层次探讨其抗骨质疏松作用的机制和构效关系，并选择活性较强的化合物进行整体动物实验，获得新的抗骨质疏松活性先导化合物。本课题将从骨质疏松研究入手，为寻找新的选择性雌激素调节药物提供新的思路。

本课题完成了以下研究内容：.1、完成了思茅藤化学成分研究，分离和鉴定化合物36个，已鉴定结构的化合物25个，新化合物7个。.2、对结构新颖的C21甾体Epigynumgenane进行半合成，合成得到Epigynumgenane的母核。.3、建立了碳酸酐酶II ( Carbonic Anhydrase II）抑制活性筛选模型，并对从思茅藤中分离得到的化合物及其合成得到的Epigynumgenane的母核进行了活性筛选。结果只有Epigynumgenane及其母核有一定抑制活性（在浓度为5µM时抑制率为1.03%和3.34%），因而进行进一步衍生物合成的意义不大。随后的动物活性实验表明C21甾体pigynumgenane及其母核组和尼尔雌醇片阳性组对照，对骨钙增高影响不明显，升高血清钙水平影响不明显，所以后期实验转而寻找化合物的其它生物活性。.4、建立了ConA（伴刀豆蛋白）刺激的Balb/c小鼠脾淋巴细胞增殖的免疫抑制活性检测模型，对从思茅藤中分离得到的化合物进行了活性筛选，结果表明多个化合物对ConA（伴刀豆蛋白）刺激的Balb/c小鼠脾淋巴细胞增殖有明显的抑制作用，特别是新化合物雄甾-4,6,8（9）,13（14）-四烯-3,11,16-三酮的免疫抑制活性与阳性对照雷公藤内酯和地塞米松相当。该发现为免疫抑制类药物的研究提供了新的先导化合物。.5、该课题目前已发表标明国家自然基金号（No.30960048）SCI收录论文1篇，EI收录论文1篇，ISTP接收发表论文2篇；授权发明专利2项，受理发明专利3项；另有1篇新化合物分离及结构鉴定的文章已投稿SCI杂志（附证明）。.说明：新化合物的活性是申请专利的基础，因为原计划的抗骨质疏松活性结果不够理想，后期经过多个生物活性模型筛选，最终在接近基金结题时才找到较好的免疫抑制活性，因而专利申请滞后。为不影响专利的新颖性，目前有2篇SCI论文还正在投稿过程中。