重构小分子尘螨变应原及其突变体的免疫调变功能研究

户尘螨中主要变应原（Der p 1）是尘螨过敏症的主要致敏蛋白，近来研究表明：对变应原B细胞表位中关键氨基酸的突变修饰可调变Th2途径向Th1途径转化，但目前Der p 1的全表位mapping未见报道。本研究拟采用固相多肽合成技术获得该变应原的全B细胞表位和其中关键氨基酸的信息，进而构建T/B细胞表位融合肽(即小分子变应原)表达质粒，再用基因定点突变技术突变该质粒中B细胞表位内的关键氨基酸。然后在大肠杆菌中表达：小分子变应原及其突变体和Der p 1蛋白。最后，通过western blot、ELISA等方法鉴定这三种蛋白与患者特异性IgE的结合活性以及免疫小鼠的血清中与调变Th2/Th1途径相关的抗体(IgE/IgG)和细胞因子(IL-4/IFN-γ)水平的差异。实验结果将为研究变应原的结构与其体内免疫调变功能的关系提供实验依据，同时，也为抗尘螨小分子低毒疫苗的研制打下物质基础。