基于miR-135a对JAK2/STAT3信号通路及HOXA10基因的调控探讨归肾丸对肾虚－薄型子宫内膜大鼠模型的干预机制

In Human natural and assisted reproductive technology (ART) cycles, the clinical pregnancy rate, live birth rate, or continuous pregnancy rate will decrease significantly when the endometrium is too thin. It has been proved that miR-135a can regulate JAK2/STAT3 signaling pathway and HOXA10 gene. While JAK2/STAT3 can regulate VEGF and COX-2; HOXA10 can regulate β3 integrin all those are very important in the establishment of endometrial receptivity. Trial shows that Guishen pill can cure thin endometrium and improve the pregnacy rate，but pharmacodynaimc mechanism is not very clear. This research is using Guishen pill prescription to intervene the thin endometrium rat with kidney deficiency syndrome model. And evaluate the the efficacy of the Guishen pill through the changes of endometrial morphology and indicators such as cytokeratin、vimentin、JAK2/STAT3、VEGF、COX-2、HOXA10、β3 integrin and miR-135a. Analyzing the regulation function of miR-135a to JAK2/STAT3 signaling pathway and HOXA10 gene expression on endometrium in order to clarify the therapeutic targets and pharmacodynamic mechanism of the Guishen pill.

在人类自然和辅助生殖技术周期中，因子宫内膜过薄而致容受性下降者，其妊娠率、活产率或继续妊娠率均明显下降。实验表明miR-135a可对JAK2/STAT3信号通路及HOXA10基因进行调控，而JAK2/STAT3信号通路调控的VEGF、COX-2因子；HOXA10基因及其下游基因整合素β3的表达在子宫内膜容受性建立过程中具有关键作用。研究发现归肾丸能增加子宫内膜厚度及腺体数目，提高临床妊娠率，但深层作用机制尚不明确。本课题采用归肾丸对肾虚－薄型子宫内膜大鼠模型进行干预，通过观察内膜形态，检测角蛋白、波型蛋白、JAK2/STAT3、VEGF、COX-2、HOXA10、整合素β3和miR-135a在内膜表达的变化来反应归肾丸的干预效果；分析在归肾丸影响下miR-135a对子宫内膜JAK2/STAT3信号通路及HOXA10基因的调控作用，以期阐明归肾丸对薄型子宫内膜的治疗靶点及药效机制。

在人类自然和辅助生殖技术周期中，因子宫内膜过薄而致容受性下降者，其妊娠率、活产率或继续妊娠率均明显下降。本课题通过SD大鼠宫腔内注射95%乙醇和450mg/kg/天×8天羟基脲灌胃液灌胃可以建立符合临床病证实际的肾虚－薄型子宫内膜大鼠模型，采用归肾丸对肾虚－薄型子宫内膜大鼠模型进行干预，通过观察内膜形态，检测角蛋白、波型蛋白、JAK2/STAT3、VEGF、COX-2、HOXA10、整合素β3和miR-135a在内膜表达的变化。实验结果表明归肾丸能够有效改善肾虚-薄型子宫内膜大鼠的肾虚相关症状，并且有效增加子宫内膜厚度，增强VEGF蛋白及HOXA10基因在薄型子宫内膜的表达，有效促进子宫内膜的增生修复。归肾丸各剂量组均对miR-135a的表达具有增强作用，其中以归肾丸中剂量组尤其显著；miR-135a与HOXA10基因呈中度正相关。归肾丸对JAK2、STAT3的表达均具有一定的促进作用。归肾丸作为一个多靶点的复方汤剂，其复杂的药效机制对多个基因及蛋白的表达均有影响，本研究为进一步的归肾丸药物研发提供了一定的理论基础和科学依据。