致医院感染的鲍曼不动杆菌中碳青霉烯耐药基因blaOXA-58的播散机制研究

鲍曼不动杆菌是医院感染的重要病原体。耐碳青霉烯的鲍曼不动杆菌日渐流行令临床医生感到非常棘手。细菌产OXA碳青霉烯酶是引起该菌耐药的主要原因。.本研究分离和收集致患者发生医院感染的携带碳青霉烯酶编码基因blaOXA-58的鲍曼不动杆菌，通过PFGE（脉冲场凝胶电泳）和MLST（多位点序列分析）分型技术对其进行菌株同源性分析，明确携带blaOXA-58基因的耐药鲍曼不动杆菌在医院内是否有克隆性播散；通过PCR 映射（包括长片段PCR）和反向PCR、鸟枪克隆的方法检测blaOXA-58的基因环境，明确鲍曼不动杆菌中blaOXA-58的拷贝数及其与耐药水平的关系，blaOXA-58是否由插入序列带动直接插入或重组而移动，继而跟随插入序列随意播散。.本研究旨在揭示耐碳青霉烯的鲍曼不动杆菌在医院内广泛播散导致持续医院感染的机制，为临床合理使用抗菌药物和制定恰当的感染控制措施提供重要的理论依据。

鲍曼不动杆菌是医院感染的重要病原体，细菌产OXA碳青霉烯酶是引起该菌耐药的主要原因。.本课题研究了致医院感染的携带碳青霉烯酶编码基因blaOXA-58的鲍曼不动杆菌复合体。研究使用扩增recA和gyrB测序的方法将这些细菌鉴定到种，并对它们进行了临床常用抗菌药物（包括碳青酶烯、头孢菌素、喹诺酮、利福霉素、四环素类药物、多粘菌素等）的敏感性测定。研究通过检测细菌碳青酶烯酶编码基因（包括A类blaGES、 blaKPC，B类blaIMP、blaVIM、blaSPM、blaGIM、blaSIM、blaNDM，和D类OXA型酶blaOXA-51、blaOXA-23、blaOXA-24、blaOXA-58、blaOXA-143）筛选出了携带blaOXA-58的鲍曼不动杆菌和皮特不动杆菌。通过脉冲场凝胶电泳（PFGE）和多位点序列分析（MLST）分型技术对细菌进行了菌株同源性分析，明确了携带blaOXA-58基因的鲍曼不动杆菌在医院内有克隆性播散，并发现了一些我国独特的携带blaOXA-58基因的鲍曼不动杆菌类型。基于S1酶切的质粒分析技术和基于I-Ceul酶切的染色体分析技术，证实了blaOXA-58基因多位于鲍曼不动杆菌和皮特不动杆菌的质粒上。接合实验和电穿孔实验证明它们都不在可接合性质粒上。通过PCR 映射（包括长片段PCR）和反向PCR、鸟枪克隆技术和全基因组测序的方法检测了blaOXA-58的基因环境，明确了耐药基因blaOXA-58不是通过复合型转座子直接插入而传播的，而可能是在插入序列的帮助下通过重组而播散的。.本课题揭示了携带blaOXA-58的鲍曼不动杆菌通过克隆性播散的方式在医院内广泛播散、造成持续医院感染的现象，阐述了鲍曼不动杆菌blaOXA-58的基因环境，提示了碳青酶烯耐药基因blaOXA-58通过在质粒DNA上重组而播散的机制，为临床合理使用抗菌药物和制定恰当的感染控制措施提供了必要的理论依据。