VEGF和CXCL12在造秞细胞型颅咽管瘤复发中的生物学机制研究

颅咽管瘤是颅内最常见的先天性肿瘤，在儿童中占幕上肿瘤的第一位，根据病理类型可以分为造釉细胞型和鳞状乳头型，前者术后复发率高、预后差。颅咽管瘤的易复发倾向，是困扰神经外科医师制定正确治疗方案的首要难题。目前颅咽管瘤复发的分子机制尚不清楚，缺乏明确的分子标志。我们前期的研究结果表明，VEGF和CXCL12在复发造釉细胞型颅咽管瘤中的表达明显升高。有报道，VEGF和CXCL12协同作用且与肿瘤发生和侵袭相关，例如：在胶质瘤细胞中，VEGF上调CXCL12的水平；而在乳腺癌中，CXCL12则可以促进VEGF的表达。同样，我们的研究结果初步显示：在颅咽管瘤中VEGF以及CXCL12两种配体介导的信号通路之间也许存在正反馈调节机制并可能与肿瘤的复发相关。本课题将在此基础上，详细阐述两种通路之间的相互作用及与肿瘤复发的关联，为临床治疗方案的制定奠定基础。

目前本课题组已按计划完成了本次实验并取得了预期目标。.1、前期收集病理资料完整的术中新鲜的颅咽管瘤标本并分为原发组与复发组两组，通过全基因芯片，qRT-PCR,免疫组织化学法，以及Western-blot方法在组织水平、RNA水平以及蛋白质水平检测并验证了VEGF以及CXCL12、CXCR4的表达水平。研究结果表明VEGF、CXCL12、CXCR4、MMP9 、 Col IV 、 Ezrin、uPA在造釉细胞型颅咽管瘤复发组阳性表达明显高于原发组（p<0.05），结合北京医院临床统计资料，CXCL12/CXCR4高表达可能导致了肿瘤的高侵袭性，侵袭的肿瘤组织呈“指样”突入毗邻正常脑组织，术后易于复发，因此VEGF、CXCL12、CXCR4、MMP9 、 Col IV 、 Ezrin、uPA可能成为评价造釉细胞型颅咽管瘤侵袭性生长和复发倾向的重要参考指标。。.2、中期本课题组从复发造釉细胞型颅咽管瘤标本中成功的培养出原代肿瘤细胞，在原代细胞中分别对CXCR4，VEGF进行抑制，通过qRT-PCR和Western-blot检测对方的表达水平，并应用免疫荧光技术和特异性抗体检测参与其中的转录因子。研究结果表明VEGF和CXCL12两种配体介导通路之间形成正反馈调节，相互协同、刺激使肿瘤发生侵袭和转移。并发现CXCL12 结合CXCR4后能激活包括丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) 途径、PI-3K/Akt途径和酪氨酸激酶途径,从而发挥其在肿瘤侵袭转移中的作用。.3、后期本课题组通过收集大量的颅咽管瘤样本（>200例），采用免疫组化的方法检测了VEGF、CXCL12、CXCR4、MMP9 、 Col IV 、 Ezrin、uPA的表达水平，同时通过半定量免疫组化的标准制定免疫组化评分体系，并结合临床资料分析，建立了与临床手术评分、免疫组化评分及复发相结合的体系，根据肿瘤复发倾向性评分体系建立颅咽管瘤个体化治疗方案，针对个体化治疗方案病人进行定期的复查和密切随访，评估方案治疗效果，进一步丰富、细化和个体化治疗方案，最终建立规范化的术后治疗指导方案。